Il genere Eschenchia, la specie E. coli, comprende Escherichia coli opportunistici (abitanti dell'intestino di esseri umani, mammiferi, uccelli, pesci e rettili) e varianti patogene per l'uomo, che differiscono tra loro per struttura antigenica, caratteristiche patogenetiche e cliniche del le malattie che provocano.

Morfologia. I bastoncini nei preparati sono disposti in modo casuale e sono mobili (peritrichi), ma esistono anche varianti prive di flagelli. Tutti gli Escherichia hanno fimbrie (pili).

Riproducendosi ad una temperatura di 37°C, formano colonie S e R su terreni solidi. Nei mezzi liquidi producono torbidità, poi un sedimento. Molti ceppi hanno una capsula o microcapsula e formano colonie mucose su terreni nutritivi.

Producono enzimi che scompongono i carboidrati (in acido e gas), proteine ​​e altri composti. Le proprietà HD sono determinate quando si differenzia l'Escherichia dai rappresentanti di altri generi della famiglia delle Enterobacteriaceae.

Antigeni. Il principale è O-ANTIGEN, che costituisce la base per la divisione in sierogruppi (circa 170 sierogruppi O). Molti ceppi di singoli sierogruppi hanno antigeni comuni con microrganismi di altri sierogruppi di Escherichia, nonché con Shigella, Salmonella e altri enterobatteri.

Gli antigeni K in Escherichia sono costituiti da 3 antigeni: B- e L-Ar termolabile, distrutto mediante ebollizione; A-Ag termostabile, inattivato a 120°C. In Escherichia sono noti circa 97 sierotipi di antigeni K.

Gli antigeni H sono tipo-specifici e caratterizzano il sierotipo all'interno dei gruppi O. Sono stati descritti più di 50 diversi antigeni H.

La struttura AG di un singolo ceppo di Escherichia è caratterizzata dalla formula (designazioni alfanumeriche O-, K- e H-AG): E. coli O26:K60(B6):H2

Ecologia e distribuzione. Vengono costantemente espulsi con le feci nell'ambiente. Rimangono vitali nell'acqua e nel terreno per diversi mesi, ma muoiono rapidamente a causa dell'azione dei disinfettanti e se riscaldati.

Gli agenti patogeni opportunisti possono causare processi infiammatori purulenti, pielite, cistite, colecistite, ecc. (colibatteriosi). Con grave immunodeficienza, potrebbe esserci coli-sepsi. La suppurazione della ferita si sviluppa anche come infezione esogena, spesso in associazione con altri microrganismi.

Quelli patogeni causano malattie intestinali acute - escherichiosi - infezioni esogene. La fonte sono i pazienti o i portatori di batteri, la via di trasmissione è nutrizionale. I bambini si ammalano più spesso.

Patogenesi. L'Escherichia coli opportunistico danneggia le cellule e i tessuti a causa dell'endotossina, che viene rilasciata dopo la morte dei microrganismi patogeni L'Escherichia patogena ha una serie di vari fattori di patogenicità; Tra gli agenti causali dell'escherichiosi ci sono enteropatogeno (moderatamente invasivo), enterotossigeno ed enteroinvasivo coli. Differiscono nella struttura antigenica e causano malattie intestinali specifiche per ciascuna variante della coltura.

Hanno fimbrie che assicurano l'attaccamento dei microrganismi alle cellule epiteliali. Le adesine delle fimbrie riconoscono recettori cellulari complementari: uropatogeni - P-fimbrie (attaccamento all'epitelio del tratto urinario), ceppi enterotossigeni si attaccano ai villi epiteliali nell'intestino tenue e lo colonizzano. Diarrea e ipercinesia si sviluppano a causa dell'azione delle enterotossine (termolabili e termostabili), che si manifesta con l'ipersecrezione dell'epitelio, il rigetto dei villi gonfi senza lo sviluppo di una reazione infiammatoria.

Enteropatogeno ceppi con moderata invasività colonizzano l’epitelio intestino tenue, in questo caso la superficie dell'epitelio viene danneggiata, i microvilli vengono respinti e si verifica l'erosione. I singoli batteri penetrano nel citoplasma delle cellule epiteliali, dei macrofagi e dei leucociti, provocando batteriemia (dopo la distruzione delle cellule fagocitate).

Enteroinvasivo i ceppi vengono adsorbiti sulla superficie delle cellule epiteliali della mucosa colon, penetrano nelle cellule epiteliali e si moltiplicano nel loro citoplasma. Le cellule muoiono e si verifica un'infiammazione catarrale ulcerosa. Clinicamente – sindrome simile alla dissenteria.

L'Escherichia patogena spesso produce emolisine. Nella patogenesi dell'escherichiosi, svolgono un ruolo le endotossine e i polisaccaridi dell'antigene K, le proteine ​​​​T, che sopprimono l'attività del complemento, la fagocitosi, inibendo le opsonine.

Immunità. La colibatteriosi si verifica negli stati di immunodeficienza. Il recupero è facilitato dall’attivazione di fattori protettivi aspecifici. L'immunità non si sviluppa dopo la malattia.

L'immunità naturale contro la colienterite nei bambini piccoli è fornita da: a) bifidumbatteri (antagonisti, colonizzano l'epitelio del tratto gastrointestinale con una biocenosi intestinale adeguatamente formata); b) anticorpi del latte materno, che contiene anche sostanze che stimolano lo sviluppo della bifidumflora.

Gli anticorpi sierici contro i ceppi enteropatogeni di Escherichia (IgM) non attraversano la placenta e quindi questo meccanismo di protezione contro le infezioni da coli nei bambini piccoli non funziona. L'immunità all'escherichiosi simile alla dissenteria viene trasmessa al bambino dalla madre mediante anticorpi IgG che passano attraverso la placenta. Questo è il motivo per cui i bambini piccoli non sono suscettibili all'escherichiosi simile alla dissenteria (e alla dissenteria), ma si ammalano facilmente di colienterite se infetti da escherichia enteropatogena.

La formazione dell'immunità intestinale locale nei bambini e negli adulti è associata alla SIgA. Dopo aver sofferto di escherichiosi, rimane un'immunità specifica del gruppo, debolmente espressa. Sono possibili malattie ricorrenti.

Diagnostica di laboratorio. I sierotipi patogeni di Escherichia coli sono isolati da feci, vomito, pus, secrezione dalla mucosa della faringe e del naso e, in caso di sepsi, dal sangue.

Anche l'acqua della lavanda gastrica, il lavaggio delle mani del personale di servizio, l'aria della stanza e i residui di cibo in caso di infezione tossica sono soggetti a test per l'Escherichia. I materiali (escluso il sangue) vengono piastrati su terreno Endo e posti in un termostato a una temperatura di 37°C. Dopo 18–24 ore di incubazione in un termostato, da questo terreno vengono selezionate colonie rosse lattosio-positive di Escherichia e agglutinate su vetro in un siero OK polivalente contenente anticorpi contro 22 sierotipi di Escherichia coli enteropatogeno (EPEC). Se la reazione di agglutinazione è positiva, le colonie vengono sottocoltivate su un agar inclinato e il giorno successivo la coltura isolata viene agglutinata in sieri polivalenti con un set più piccolo di anticorpi, e poi in ciascuno di quelli inclusi nella miscela che ha causato l'agglutinazione di l'Escherichia isolata. Nella fase finale dell'identificazione sierologica dell'EPKP, viene eseguito un test di agglutinazione dettagliato in un siero specifico. Per fare ciò, il siero diagnostico viene diluito in due file di provette al titolo indicato sull'etichetta della fiala. In uno di essi viene aggiunta la coltura riscaldata lavata via dall'agar inclinato, nell'altro la sua sospensione bollita. Le provette vengono poste in un termostato a 37°C per 24 ore. I ceppi ECP omologhi al siero dovrebbero agglutinarsi ad almeno la metà del titolo.

La coltura che ha dato una reazione di agglutinazione dettagliata e positiva viene seminata nei terreni della serie Hiss per studiarne le proprietà saccarolitiche e proteolitiche.

Prevenzione e trattamento. Rispetto delle norme igienico-sanitarie, identificazione dei pazienti e dei portatori. Non è stata sviluppata una prevenzione specifica. Per trattare le malattie causate da E. coli, vengono utilizzati preparati biologici di microbi antagonisti: bifidumbatterino, lattobatterino.

Gli E. coli sono sensibili a numerosi antibiotici, ma negli ultimi anni il numero di ceppi resistenti agli antibiotici è aumentato a causa del trasferimento di plasmidi R.

15. Yersinia. Diagnosi di laboratorio di pseudotubercolosi e yersiniosi intestinale, peste.

Genere Yersinia Il genere comprende 11 specie. Y.pestis provoca una pestilenza Y.pseudotuberculesi- pseudotubercolosi, Y. enterocolitica- yersiniosi (intestinale), alcune specie non sono patogene o opportunistiche per l'uomo.

Morfologia. Più spesso hanno una forma ovoidale (cocco-bacillare), sono colorati in modo bipolare e sono inclini al polimorfismo. La maggior parte delle specie sono mobili a temperature inferiori a +30 gradi Celsius (hanno flagelli peritrichi), sono Gram-negativi e hanno una sostanza capsulare. Y.pestis non è mobile e ha una capsula.

Proprietà culturali e biochimiche.

Anaerobi facoltativi. La temperatura ottimale va da +25 a + 28 gradi Celsius, il pH è vicino alla neutralità. Crescono bene su terreni nutritivi semplici. La maggior parte dei carboidrati fermenta senza produrre gas. Yersinia è in grado di modificare il suo metabolismo a seconda della temperatura e riprodursi a basse temperature ( proprietà psicofile). I ceppi virulenti formano colonie ruvide (R), forme transitorie (RS) e mucose lisce grigiastre (S).

Quando si studiano le colonie del microbo della peste, si distinguono due tipi di colonie: giovani e mature. Giovani microcolonie dai bordi irregolari (fase del “vetro rotto”) si fondono successivamente, formando delicate formazioni piatte con bordi smerlati (fase del “fazzoletto di pizzo”). Le colonie mature sono grandi, con un centro granulare marrone e bordi frastagliati ("margherite"). Molti ceppi sono in grado di ridurre i coloranti che presentano supporti scoloriti (blu di metilene, indaco, ecc.). Su agar inclinato, dopo due giorni a +28 C, si forma un rivestimento bianco-grigiastro, che cresce nel terreno, si forma una pellicola superficiale delicata e un sedimento simile al cotone; La temperatura +37°C è selettiva per la formazione delle capsule in Y.pestis. Le colture di Y.pseudotuberculosis e Y.enterocolitica non hanno lo stadio di “vetro rotto”, inizialmente sono piccole, lucide, convesse, poi si può osservare una crescita confluente con la forma. formazione di colonie convesse, tuberose, simili alle colonie Y .pestis. Crescono su terreni nutritivi universali (terreno Endo, agar Mac Conkey, terreno Serov, ecc.) in combinazione con metodi di accumulo in condizioni fredde.

Struttura antigenica. Tutti i tipi di Yersinia hanno un antigene O (endotossina), simile agli antigeni O di altri batteri gram-negativi e tossico per l'uomo e gli animali. I complessi lipopolisaccaride-proteina degli antigeni O di Yersinia sono divisi in S (liscio) e R (ruvido), quest'ultimo comune a Y. pestis e Y. pseudotuberculosis. Y. enterocolitica ha un antigene di superficie comune ad altri enterobatteri. L'agente eziologico della pseudotubercolosi è diviso in 13 sierotipi basati sugli antigeni O e H, i sierotipi I, così come III e IV sono più comuni, la yersiniosi è divisa in. Vengono isolati 34 sierotipi basati sull'antigene O, il più delle volte umani. A temperature da +22 a +25C Y.pseudotuberculosis e Y.enterocolitica hanno antigene flagellare e sono mobili a +37C perdono antigene H e motilità;

Y. pestis è antigenicamente più omogeneo, avendo un antigene capsulare (frazione I), antigeni T, V - W, proteine ​​della plasmacoagulasi, fibrinolisina, membrana esterna, ecc. Il microbo della peste secerne batteriocine (pesticine), che hanno un effetto battericida su il microbo della pseudotubercolosi e i ceppi coli.

Proprietà patogene. L'agente eziologico della peste ha il maggiore potenziale patogeno tra i batteri. Sopprime le funzioni del sistema fagocitico, poiché sopprime l'esplosione ossidativa nei fagociti e si moltiplica senza ostacoli in essi. I fattori di patogenicità sono controllati da tre classi di plasmidi. Nella patogenesi, ci sono tre fasi principali: introduzione linfogena, batteriemia, setticemia generalizzata. Gli agenti causali della pseudotubercolosi e della yersiniosi hanno adesine e invasine, proteine ​​a basso peso molecolare (inibiscono i fattori battericidi) e l'enterotossina. Alcuni fattori sono controllati da plasmidi di virulenza.

Caratteristiche cliniche. La peste si manifesta più spesso nelle forme bubbonica, polmonare e intestinale. I più pericolosi sono i pazienti affetti da peste polmonare, che secernono enormi quantità di agente patogeno nell'espettorato).

La yersiniosi e la pseudotubercolosi sono infezioni intestinali. Il quadro clinico è vario: linfoadenopatia regionale (imita l'appendicite), enterocolite, artrite reattiva, spondilite anchilosante, scarlattina.

Caratteristiche epidemiologiche.

La peste è una classica zoonosi focale naturale degli animali selvatici. I principali vettori in natura sono le marmotte, i roditori, i gerbilli, i pika e in condizioni antropourgiche (urbane) i ratti (la piaga delle città portuali). Nella trasmissione dell'agente patogeno, soprattutto nelle aree in cui predominano gli animali non ibernati, le pulci animali sono in grado di attaccare e infettare l'uomo. I cammelli possono essere infettati in caso di epidemie di sabbia e rappresentare un rischio epidemico.

La pseudotubercolosi e la yersiniosi intestinale sono trasmesse in natura dai roditori. Possono essere conservati a lungo e accumularsi anche a basse temperature, ad esempio nei negozi di ortaggi. Può provocare malattie negli animali da allevamento. Trasmesso all'uomo principalmente attraverso prodotti alimentari di animali e piante.

Diagnostica di laboratorio. La diagnosi batteriologica della peste può essere effettuata solo da laboratori specializzati di stazioni e istituti antipeste (gruppo di patogenicità 1). I metodi per la rilevazione dell'antigene espresso sono MFA, RPGA con diagnostico eritrocitario, sensibilizzato con anticorpi monoclonali contro l'antigene capsulare, ELISA, RNAT. Per la diagnosi sierologica è possibile utilizzare ELISA, RNAG, ELISA.

Durante la diagnosi batteriologica della yersiniosi intestinale e della pseudotubercolosi, a causa dell'accumulo dell'agente patogeno a basse temperature (a differenza della maggior parte degli altri microrganismi), il materiale viene prima portato in una soluzione salina tamponata e conservato in frigorifero con inoculazioni periodiche su Endo, Ploskirev, e i media Serov. Le colonie sospette vengono sottocoltivate per ottenere colture pure, studiate in base alle loro proprietà biochimiche e identificate in RA con sieri diagnostici, per la diagnosi sierologica vengono utilizzati RA e RNGA (per pseudotubercolosi - con sierotipo I, per yersiniosi - con sierotipo O3 e O9) con il. studio di campioni prelevati nella dinamica del processo infettivo di sieri appaiati.

Prevenzione specifica. Utilizzato nelle epidemie di peste. Viene utilizzato un vaccino vivo attenuato del ceppo EV. Esiste un vaccino in compresse secche per uso orale. Per valutare l'immunità alla peste (post-infettiva naturale e vaccino), un test allergico intradermico con pestina.

Questo genere è rappresentato da una sola specie di batteri: E. coli, ma presenta molte varianti. Le varietà di E. coli differiscono nelle proprietà biologiche; possono avere diversi set di enzimi (biovar) e diverse strutture antigeniche (sierovar).

L'Escherichia coli fu isolato per la prima volta nel 1888 da Escherich dalle feci umane e prese il suo nome.

L'habitat naturale di E. coli è l'intestino umano. L'Escherichia coli è un rappresentante della normale microflora intestinale.

Durante la sua vita, l'E. coli produce enzimi che favoriscono la digestione (ad esempio, scomponendo le fibre) e sintetizza alcune vitamine (ad esempio le vitamine del gruppo B). Inoltre, questi batteri mostrano un effetto antagonista contro i microrganismi patogeni, come i patogeni della dissenteria, della febbre tifoide e delle infezioni tossiche. L'assenza di E. coli nell'intestino crasso porta a una malattia grave: la disbiosi. In questo caso, la normale composizione della microflora intestinale viene interrotta, si sviluppano Proteus, flora coccalica, funghi, ecc.

Quando la resistenza del corpo diminuisce (fame, superlavoro, ecc.), L'Escherichia può penetrare in altri organi e tessuti e causare gravi processi patologici. Possiamo quindi considerare gli Escherichia come tipici microrganismi opportunisti: in condizioni normali sono saprofiti, mentre quando le condizioni cambiano causano malattie.

Escreto nelle feci, l'E. coli entra nell'ambiente esterno. Il rilevamento di E. coli nel suolo, nell'acqua e in altri oggetti indica la loro contaminazione fecale e la determinazione della quantità di E. coli (titolo di coli, indice di coli) caratterizza le condizioni sanitarie dell'oggetto (vedere "Microbiologia sanitaria").

Morfologia. Gli E. coli sono bastoncini corti, in media 0,5-3,0 × 0,5-0,8 µm. Gram negativi. Nella maggior parte dei casi sono mobili, peritrichi. Tuttavia, alcune varianti di E. coli non sono mobili. Molti ceppi formano una capsula. Non c'è controversia.

Coltivazione. L'Escherichia coli è un anaerobio facoltativo. Cresce bene su terreni nutritivi semplici a 37° C e pH 7,2-7,8. I ceppi di E. coli isolati dall'intestino di esseri umani e animali si sviluppano a 43-45 ° C e l'E. coli degli animali a sangue freddo non si riproducono in queste condizioni. Questa differenza nelle proprietà di E. coli di diversa origine viene utilizzata per determinare le condizioni sanitarie di un oggetto, poiché solo il rilevamento di E. coli a sangue caldo indica un problema sanitario.

Sull'MPA, l'E. coli forma colonie umide torbide, leggermente convesse e con bordi levigati. Su MPB conferisce torbidità uniforme. Le colture che hanno una capsula crescono sotto forma di colonie mucose.

Per identificare l'Escherichia si utilizzano terreni diagnostici differenziali: endo ed eosina blu di metilene (EMB). Sul terreno Endo, E. coli cresce sotto forma di colonie rosso cremisi con o senza lucentezza metallica. Su terreno EMS - sotto forma di colonie viola scuro.

Proprietà enzimatiche. E. coli hanno una significativa attività enzimatica. Scompongono il lattosio, il glucosio, il mannitolo, il maltosio, il saccarosio e altri carboidrati e alcoli per formare acido e gas. Proprietà lroteolitiche: forma indolo. La gelatina non viene scomposta. Alcune biovar non fermentano il lattosio e il saccarosio (Tabella 29).

Nota, kg - formazione di acido e gas; + presenza di un segno; - assenza di un segno.

Tossigenicità. Gli Escherichia possiedono endotossina (liggopolisaccaride).

Struttura antigenica. Gli Escherichia differiscono nella struttura antigenica della cellula microbica, che costituisce la base per la classificazione dei batteri di questo genere. Esistono tre tipi di antigeni di Escherichia: antigene O (somatico), antigene K (capsulare) e antigene H (flagellare). L'antigene O termostabile è un complesso lipopolisaccaride-proteina e si trova nella parete cellulare dei batteri. L'antigene O determina se una coltura appartiene a un gruppo sierologico. Sono stati descritti più di 170 gruppi di questo tipo. Alcuni componenti dell'antigene O sono comuni a diversi gruppi O di Escherichia e talvolta ad altri enterobatteri (Shigella, Salmonella, ecc.). Gli antigeni K di Escherichia sono diversi: A, B, L e M. Gli antigeni A e M sono termostabili, B e L sono termolabili. L'antigene K si trova più superficialmente nella cellula microbica rispetto all'antigene O e quindi, in sua presenza, non si verifica la reazione di agglutinazione di una coltura vivente con siero O. Per rilevare l'antigene O, la coltura viene riscaldata per un'ora a 100 ° C: l'antigene K viene distrutto durante il riscaldamento e l'antigene O diventa in grado di interagire con il siero. È stato stabilito che l'Escherichia possiede circa 100 tipi di antigeni K, principalmente antigeni di tipo B (termolabili). L'antigene H è presente solo nei ceppi mobili, poiché è associato ai flagelli. Nell'Escherichia sono conosciuti più di 50 tipi di antigeni H. La determinazione dell'antigene H consente di determinare la sierovariante della coltura isolata (Fig. 40).

Le caratteristiche della composizione antigenica della coltura isolata di Escherichia sono fornite sulla base dei risultati di una reazione di agglutinazione con sieri contenenti anticorpi O, K e H. Allo stesso tempo, viene determinato quali antigeni sono presenti nella coltura e la loro combinazione caratterizza la formula antigenica della coltura isolata, cioè la sua sierovariante. La Tabella 30 presenta esempi della struttura antigenica di alcuni sierotipi di E. coli in cui gli antigeni K sono antigeni B.

Se la coltura è agglutinata con il siero OK OP1:K58 (B4) e il siero H "6", allora è stata isolata la sierovariante O111:B4:H6 di E. coli; se si nota una reazione di agglutinazione con il siero OK O26:K60 (B6) e con il siero H “11”, viene isolata una coltura di E. coli 026:B6:H11, ecc.

Oltre a determinare la sierovariante di E. coli, è anche possibile determinare il fagovar della coltura isolata. Esistono gruppi di batteriofagi che lisano l'Escherichia dei singoli sierogruppi. Mediante la lisi di una coltura, uno dei fagi stabilisce il proprio fagovar. L'identificazione dei prodotti dei fagi è di importanza epidemiologica.

L'effetto antagonista dell'E. coli e la loro capacità di sopprimere la crescita di batteri putrefattivi e patogeni vengono utilizzati per creare preparati batterici per il trattamento della disbiosi e di varie malattie intestinali (colibacterin, bificol).

Resistenza ai fattori ambientali. E. coli è abbastanza resistente. A 55°C muoiono entro un'ora, a 60°C - in 15 minuti. Rimangono nel terreno e nell'acqua fino a 2-3 mesi; nel latte non solo sopravvivono, ma si moltiplicano. Soluzioni disinfettanti (cloramina al 3%, soluzione mercurica 1:1000, ecc.) li uccidono in 20-30 minuti. E. coli è particolarmente sensibile agli effetti del verde brillante.

Suscettibilità degli animali. L'Escherichia di alcuni sierogruppi è patogeno per vari animali e causa in essi malattie gastrointestinali. Tra gli animali da laboratorio, i porcellini d'India, i conigli e i topi bianchi sono i più sensibili all'E. coli. A seconda della modalità di somministrazione, la coltura di E. coli provoca diversi processi patologici: infiammazione e ascesso con iniezioni sottocutanee, peritonite e sepsi con somministrazione intraperitoneale ed endovenosa.

Fonti di infezione. Un uomo malato. In questo caso i batteri entrano nel corpo dall'ambiente esterno (infezione esogena). E. coli può anche causare lo sviluppo di un processo patologico “dall'interno” (infezione endogena).

Vie di trasmissione. La principale via di trasmissione della forma esogena dell'infezione avviene attraverso il contatto domestico (contatto indiretto). Gli agenti patogeni possono trasmettersi sulle mani sporche, attraverso i piatti, i giocattoli, la biancheria intima, il cibo, le mosche.

Patogenesi. Le malattie causate da Escherichia sono chiamate Escherichiosi. Lo sviluppo dell'escherichiosi dipende dalla via di introduzione dell'agente patogeno nell'organismo e dal sierogruppo a cui appartiene l'agente patogeno. Quando i batteri entrano attraverso la bocca possono verificarsi malattie intestinali nei bambini e negli adulti. Alcuni Escherichia del gruppo O (sierotipi) sono i patogeni più comuni delle malattie umane. Tali batteri sono chiamati Escherichia coli enteropatogeni (EPEC). Attualmente sono note molte varianti dell'ECP, che causano diversi decorsi di escherichiosi. Esistono diversi gruppi di ECP:

gruppo I - agenti causali della colienterite nei bambini piccoli (sierogruppi O111, O26, O55, O86, ecc.);

gruppo II - agenti causali di malattie simili alla dissenteria nei bambini e negli adulti (O25, O124, O143, O144, ecc.);

gruppo III - agenti causali di malattie simili al colera (O1, O5, O6, O78, ecc.).

Una volta nei prodotti alimentari, l'E. coli può moltiplicarsi in essi. Il consumo di tali prodotti porta allo sviluppo di malattie di origine alimentare.

Lo sviluppo di un'infezione endogena porta a danni a vari organi: infiammazione della cistifellea (colecistite), della vescica (cistite), avvelenamento del sangue (sepsi), ecc.

Immunità. L'immunità si sviluppa solo contro una sierovariante di Escherichia, l'agente eziologico di questa malattia. La diversità dell'Escherichia rende questa immunità praticamente inefficace. Nello sviluppo dello stato immunitario dei bambini malati è di grande importanza la formazione di anticorpi IgM, che non attraversano la placenta e quindi non vengono trasmessi dalla madre. Gli anticorpi IgA contro l'Escherichia vengono trasmessi al bambino dalla madre attraverso il latte materno.

Prevenzione. Mantenimento delle condizioni igieniche e sanitarie personali. Non esiste una prevenzione specifica.

Trattamento. Antibiotici: ampicillina, tetraciclina, ecc. Attualmente viene prodotto il fago coliproteus, il cui utilizzo dà buoni risultati.

Domande di controllo

1. Quali sono le principali caratteristiche dei batteri della famiglia intestinale?

2. Quali antigeni ha l'Escherichia?

3. Quali preparati medicinali vengono preparati da E. coli?

Esame microbiologico

Scopo dello studio: isolamento e identificazione delle EPC.

Materiale per la ricerca

1. Movimenti intestinali.

2. Vomito.

Se necessario, esamina le secrezioni dal naso e dalla faringe, il pus dall'orecchio, il sangue, l'urina, pezzi di organi di un cadavere.

Se si verifica un'epidemia di coli-enterite, vengono esaminati i prodotti alimentari, i lavaggi delle mani del personale di servizio, i giocattoli e altri oggetti (secondo le indicazioni epidemiologiche).

Nota. Quanto prima vengono esaminate le feci dall'inizio della malattia, tanto più è probabile che l'agente patogeno possa essere isolato.

Principale metodo di ricerca

Batteriologico

Avanzamento dello studio

Secondo giorno di studio

Togliere dal termostato le coppe seminate il giorno prima ed esaminarle alla luce incidente o trasmessa. Se sono presenti colonie rosso cremisi sul terreno Endo (con o senza lucentezza metallica) o colonie viola sul terreno EMS, viene eseguita una reazione di agglutinazione di prova su vetro per differenziare l'EPC da altre varietà di Escherichia.

Per eseguire una reazione di agglutinazione di prova si selezionano almeno 10 colonie isolate, contrassegnandole o numerandole sul retro della piastra; parte di ciascuna colonia bersaglio viene rimossa con un'ansa e agglutinata in una goccia di siero polivalente o immunoglobulina. Viene testata solo una parte della colonia in modo che, in caso di reazione di agglutinazione positiva, sia possibile isolare una coltura pura dal resto della colonia.

I sieri di Escherichia standard o polivalenti (o immunoglobuline) vengono preparati in condizioni industriali. I sieri polivalenti di Escherichia OK (o immunoglobuline OK) contengono anticorpi contro diversi antigeni O e K di Escherichia. Con il loro aiuto viene determinata approssimativamente l'appartenenza della cultura selezionata all'EPKP. Ad esempio, il siero polivalente O26, O55, O111 consente di identificare le colture di Escherichia con lo stesso nome. I sieri vengono diluiti secondo le indicazioni sull'etichetta.

In laboratorio è possibile preparare una miscela di singoli sieri OK, combinando non più di 5 sieri, in modo che la diluizione di ciascuno non sia superiore a 1:10.

Impostazione di una reazione di agglutinazione di prova. Applicare 10 gocce di siero polivalente (o immunoglobulina) su uno o due vetrini ben sgrassati. Aggiungere ad ogni goccia una porzione della colonia prevista e macinarla. Le colonie che hanno dato una reazione di agglutinazione vengono filtrate in provette con agar inclinato e poste in un termostato per 18-20 ore. Se nessuna delle 10 colonie ha dato una reazione di agglutinazione, viene data una risposta negativa.

Terzo giorno di studio

Togli i raccolti dal termostato e ispezionali. Sull'MPA, l'E. coli enteropatogeno forma solitamente un rivestimento umido, lucido, grigiastro, meno spesso è torbido. La coltura cresciuta su agar inclinato viene nuovamente testata in una reazione di agglutinazione in vetro con sieri di Escherichia polivalenti (o immunoglobuline). Se la coltura isolata dà una reazione di agglutinazione con siero polivalente (immunoglobulina), allora viene agglutinata separatamente con ciascun siero standard (immunoglobulina) in una diluizione di 1:5 - 1:10. L'agglutinazione con colture vive è indicativa.

Successivamente è necessario confermare mediante test biologici che la coltura selezionata appartenga al genere Escherichia. Per fare ciò, la coltura viene seminata su terreni Hiss semiliquidi con lattosio, glucosio, mannitolo, saccarosio, maltosio e altri zuccheri, nonché su brodo o acqua peptonica per determinare la formazione di indolo e idrogeno solforato. Per fare ciò, due cartine indicatrici inumidite con reagenti che rilevano la formazione di queste sostanze vengono abbassate nelle provette sotto il tappo. Un pezzo di carta diventa rosso in presenza di indolo, l'altro diventa nero in presenza di idrogeno solforato.

Durante la fermentazione degli zuccheri, la reazione del mezzo diventa acida e il colore dell'indicatore cambia. Se oltre all'acido si forma gas, nel mezzo compaiono delle bolle. Allo stesso tempo, viene determinata la mobilità dei batteri: vengono inoculati in agar semiliquido (0,2%) mediante puntura. I batteri mobili rendono torbido l'intero ambiente, mentre i batteri immobili crescono solo se punti.

Per l'identificazione finale della coltura isolata, viene eseguita una reazione di agglutinazione dettagliata con colture vive e riscaldate: con colture vive - per determinare l'antigene K, con colture riscaldate - per determinare l'antigene O. Per mettere in scena una reazione di agglutinazione dettagliata, l'antigene viene preparato come segue: 3-5 ml di soluzione isotonica di cloruro di sodio vengono lavati via dalla coltura dallo slant dell'agar. La sospensione risultante viene versata in due provette. Uno di essi viene riscaldato a bagnomaria a 100°C per un'ora.

Una reazione di agglutinazione dettagliata viene eseguita in due file di provette. Il siero in entrambe le file viene diluito in un rapporto di 1:50 - 1:100 (nella prima provetta) al titolo indicato sull'etichetta della fiala del siero. Aggiungi 2 gocce di coltura viva alla prima fila e 2 gocce di coltura riscaldata alla seconda fila.

Le provette vengono agitate e poste in un termostato per 18-24 ore.

Quarto giorno di ricerca

Vengono presi in considerazione i cambiamenti nei mezzi Hiss e viene registrata la formazione di indolo e idrogeno solforato.

La maggior parte dei rappresentanti di Escherichia fermentano i carboidrati con la formazione di acido e gas e scompongono il substrato nutritivo proteico per formare indolo.

La reazione di agglutinazione in provetta viene registrata utilizzando una lente d'ingrandimento o un agglutinoscopio. L'agglutinazione con una coltura viva è a grana grossa, con una coltura uccisa è a grana fine. La reazione è considerata positiva se si osserva un'agglutinazione con una coltura riscaldata in una diluizione del siero pari ad almeno la metà del titolo sierico e una coltura viva viene agglutinata con siero diluito almeno 1:200. Anche il rapporto tra anticorpi e colture riscaldate e vive gioca un ruolo. La diluizione del siero in cui si nota l'agglutinazione con una coltura riscaldata deve superare di almeno 2 volte la diluizione del siero in cui si nota l'agglutinazione di una coltura viva. Nella tabella 31 mostra diverse opzioni per il risultato della reazione di agglutinazione.

Nota. Sono possibili tre opzioni di reazione: 1) la coltura riscaldata viene agglutinata con siero in diluizioni più elevate rispetto a quella viva, la reazione è positiva; 2) le colture vive e riscaldate danno l'agglutinazione in uguali diluizioni di siero. Questo risultato può indicare l'assenza dell'antigene K nella coltura; l'agglutinazione delle colture vive e riscaldate è causata dall'antigene O. In questi casi è necessario ripetere la reazione di agglutinazione; 3) l'agglutinazione di una cultura vivente in assenza dell'agglutinazione di Greta ci consente di dare una risposta negativa. Ovviamente nella coltura non è presente alcun antigene O corrispondente agli anticorpi O nel siero (Fig. 41).

Domande di controllo

1. Quale materiale viene esaminato per isolare l'Escherichia?

2. Quali sieri possono essere utilizzati per differenziare l'EPKP?

3. Perché viene eseguita una reazione di agglutinazione dettagliata con colture di Escherichia vive e riscaldate?

1. Ottenere dall'insegnante piastre Petri con una coltura inoculata su terreno Endo e sottocoltura su una provetta con agar inclinato.

2. Prendere la coltura EPC su agar slant dall'insegnante, sciacquare con soluzione isotonica di cloruro di sodio. Riscaldare parte del lavaggio a bagnomaria a 100° C. Diluire il siero in due file di provette ed effettuare la reazione di agglutinazione come sopra descritto.

Strumenti della cultura

I terreni differenziali Endo ed EMS vengono utilizzati per la coltivazione di batteri intestinali. Disponibile sotto forma di polvere secca. Secondo le istruzioni sull'etichetta, pesare una certa quantità di terreno secco, scioglierlo nella quantità appropriata di acqua, far bollire, mescolare e versare in piastre Petri sterili.

C'è un vuoto nella tua vita privata? Non hai una ragazza normale? Sono puttane seducenti che daranno ogni opportunità per soddisfare i tuoi bisogni sessuali in modi carini.

Escherichia come agenti eziologici delle infezioni nosocomiali.

Le infezioni contratte in ospedale, chiamate anche infezioni nosocomiali, sono un’importante causa di morbilità e mortalità. Sono definite come infezioni che si verificano in pazienti dopo il ricovero in un istituto medico, a condizione che al momento del ricovero il paziente non presentasse manifestazioni cliniche di questa infezione e non fosse nel periodo di incubazione. In questa categoria rientrano anche le infezioni contratte dal paziente durante la degenza ospedaliera, ma che non si sono manifestate clinicamente fino alla dimissione. Le infezioni opportunistiche si sviluppano in pazienti con meccanismi di difesa danneggiati. Sono causati da agenti infettivi che di solito non causano malattie nelle persone sane. La causa di molte infezioni opportunistiche sono i microrganismi che fanno parte della microflora del paziente (autoinfezione), e queste infezioni opportunistiche sono spesso inevitabili, poiché il loro sviluppo è associato a difetti delle mucose o di altri meccanismi protettivi (infezione autoctona).

Uno dei patogeni più comuni – rappresenta circa il 19% delle infezioni nosocomiali – è l'Escherichia coli. Questo microrganismo è un commensale del tratto gastrointestinale, da dove, se la permeabilità delle normali barriere anatomiche viene interrotta, può diffondersi e colpire gli organi adiacenti. Dopo che l'infezione è entrata nel focolaio primario, la sua ulteriore diffusione avviene attraverso il flusso sanguigno. La batteriemia risultante, possibile con tutte le infezioni da Gram-negativi, può portare allo shock indotto dalle endotossine. I fattori che predispongono alla batteriemia comprendono il diabete mellito, la cirrosi epatica, la leucemia, il linfoma o il carcinoma, i farmaci chemioterapici antineoplastici o gli immunosoppressori, nonché una serie di procedure chirurgiche e infezioni delle vie urinarie, biliari e gastrointestinali. I gruppi particolarmente a rischio sono i neonati, le donne incinte e gli anziani con disturbi urinari dovuti a patologie della prostata.

In oltre il 50% delle malattie causate da E. coli, il punto di ingresso dell'infezione è il tratto urinario; Sono comuni anche le infezioni che originano dal fegato e dai dotti biliari della cavità addominale, della pelle e dei polmoni.

Morfologia, fisiologia. Gli Escherichia sono bastoncini che misurano 1,1 - 1,5 x 2,0-6,0 micron. Si trovano casualmente nei preparativi. Quelli mobili sono pertrichi, ma esistono anche varianti prive di flagelli. Tutti gli Escherichia hanno fimbrie (pili). Riproducendosi ad una temperatura di 37 °C, formano colonie S e R su terreno denso (mezzo Endo). Nei mezzi liquidi producono torbidità, poi un sedimento. Molti ceppi hanno una capsula o microcapsula e formano colonie mucose su terreni nutritivi.

Le proprietà biochimiche dell'Escherichia sono determinate differenziando l'Escherichia dai rappresentanti di altri generi, la famiglia delle Enterobacteriaceae. Formano indolo, non danno una reazione Voges-Proskauer positiva, non formano H2S e producono enzimi che scompongono glucosio, lattosio, saccarosio, mannitolo con formazione di acido e gas.

Antigeni. L'Escherichia possiede antigeni somatici (O), capsulari (K) e flagellari (H). In base alla specificità dell'antigene O, gli E. coli sono divisi in sierogruppi (circa 170). Molti ceppi di singoli sierogruppi hanno antigeni comuni con microrganismi di altri Escherichia, nonché Shigella, Salmonella e altri enterobatteri.

Gli antigeni K in Escherichia sono costituiti da 3 antigeni: A, B, L, che differiscono per sensibilità agli effetti della temperatura: gli antigeni B e L sono termostabili e vengono distrutti mediante ebollizione; L'A-anigene è termostabile e viene inattivato solo a 120 °C. La posizione superficiale degli antigeni K maschera l'antigene O, che viene determinato dopo aver fatto bollire la coltura del test. In Escherichia sono noti circa 97 sierotipi di antigeni K.

Gli antigeni H sono tipo-specifici, caratterizzando un sierotipo specifico all'interno dei gruppi O. Sono stati descritti più di 50 diversi antigeni H.

Fattori di patogenicità dell'Escherichia e patogenesi dell'Escherichiosi. L'Escherichia coli possiede fattori di adesione, colonizzazione (fimbrie e pili, fibrille) e tossicità (endotossine, enterotossine, emolisine, lecitine).

L'endotossina può causare shock settico nella batteriemia influenzando le membrane cellulari e i componenti della coagulazione del sangue e dei sistemi del complemento (via classica e alternativa), che porta ad un aumento della coagulazione del sangue, danni cellulari e interruzione del flusso sanguigno, in particolare della microcircolazione.

Enterotossine, natura proteica (la sintesi è determinata dal plasmide Ent) - termolabile (LT), che ricorda i colerogeni, è composta da cinque subunità B e una subunità A (penetra nella cellula e attiva l'adenilato ciclasi), ad azione rapida e termostabile ( ST) agendo lentamente.

La sintesi delle emolisine è assicurata dal plasmide Hly.

Un abitante normale dell'intestino umano è l'Escherichia coli opportunista, che contiene endotossine e fimbrie (pili) e non provoca malattie in condizioni normali.

Le malattie intestinali acute sono causate dall'Escherichia patogeno. A seconda della combinazione dei fattori di patogenicità, si distinguono:

1. ETE (Escherichia enerotossigena), in cui predomina l'enterotossina. Colonizzano i microvilli senza danneggiarli, causando ipersecrezione di liquidi, diarrea grave e disidratazione (diarrea del viaggiatore, malattie simili al colera nei bambini). Sierogruppi O4, O6, O20, O78, ecc.

2. EPE (Escherichia enteropatogena), causa gastroenterite, colonizzando il plasmalemma con danno all'epitelio. Sierogruppi O26, O55, O111.

3. L'EIE (Escherichia enteroinvasiva) si moltiplica all'interno delle cellule epiteliali, provocando la distruzione cellulare e causando malattie simili alla dissenteria. Sierogruppi O124, O144.

4. Escherichia, causante colite emorragica (che agisce sulla permeabilità vascolare) O157.

Vie di infezione fecale-orale, domestico (attraverso apparecchiature mediche, autoinfezione). La fonte dell’infezione è l’uomo. Di grande importanza è la possibilità di una rapida diffusione di plasmidi patogeni tra i microrganismi correlati.

Diagnostica L'escherichiosi viene eseguita utilizzando il metodo batteriologico. Nella prima fase - inoculazione del materiale (feci in caso di malattia respiratoria acuta, urina in caso di infiammazione genito-urinaria, bile, compartimenti purulenti, sangue in caso di colisepsi) su mezzi diagnostici differenziali (mezzo Endo), nella seconda fase - identificazione delle colonie, microscopia di Gram; effettuare una reazione di agglutinazione su vetro con materiale proveniente da singole colonie con siero O polivalente (per determinare la specie), quindi con sieri O e H monovalenti; trasferimento nel mezzo di Ressel (coltura pura). Nella terza fase, l'appartenenza ai sierogruppi e alle sierovarianti viene determinata nella reazione di agglutinazione su vetro e una reazione di agglutinazione dettagliata viene eseguita in provette; determinare le proprietà biochimiche (semina su una fila variegata, reazione di Voges-Proskauer); eseguire la tipizzazione dei fagi, determinare la sensibilità agli antibiotici.

Prevenzione e trattamento. Nella prevenzione delle co-infezioni dei bambini piccoli, il rispetto delle norme sanitarie e igieniche negli ospedali per maternità e negli istituti pediatrici, dove esiste il pericolo di diffusione dell'Escherichia patogena, è di primaria importanza identificare pazienti e portatori, isolarli e trattarli.

Pagina 47 di 91

L'Escherichia coli fu scoperto nel 1885 da Escherich e chiamato Escherichia coli. Questi batteri, che vivono nell'intestino dell'uomo e degli animali, in determinate condizioni possono diventare virulenti e causare una serie di processi patologici.
Morfologia e proprietà tintoriali. E. coli ha l'aspetto di un bastoncino diritto con estremità arrotondate che misura da 2,5 a 3 micron di lunghezza e da 0,5 a 0,8 micron di larghezza. Talvolta si riscontrano forme accostate a cocchi oa lunghi filamenti (Fig. 78).
Proprietà culturali e biochimiche. L'Escherichia coli si riproduce in condizioni aerobiche ad una temperatura di 37°. È senza pretese per i mezzi nutritivi. Su agar ordinario, dopo un giorno di crescita, si formano colonie lattiginose-bluastre a grana fine con un diametro di 2-3 mm. Conferisce una torbidità uniforme al brodo. Alla fine della giornata si forma l'indolo. Il latte caglia dopo 1-4 giorni a causa della formazione di acido lattico. E. coli decompone glucosio, maltosio, lattosio e mannitolo per formare acido e gas. Non liquefa la gelatina.

Riso. 78. Batteri del gruppo del tifo enterico.
1- flagello del bacillo tifoide; 2 - colonie; 3 - macchie di cultura: a - tifo; b - paratifo; c - dissenteria; g-Escherichia coli; 4 - formazione di colonie in S. Schottmti lleri.
Caratterizzato dalla sua ampia adattabilità alle mutevoli condizioni di vita, l'E. coli può modificare le sue proprietà biochimiche. A questo proposito si distinguono le seguenti varietà:

Struttura antigenica. La ricerca di Kaufman ha stabilito che l'E. coli ha una struttura antigenica complessa, costituita da tre diversi tipi di antigeni:

1. antigene somatico termostabile (antigene O);
2. antigene flagellare e termolabile (antigene H);
3. Antigene K termolabile della superficie somatica, dell'involucro o della capsula, che contiene vari antigeni capsulari di superficie (antigeni L, B, Vi termolabili e A, M termostabili).

Resistenza. Se riscaldato in sospensione, l'E. coli muore a 55° dopo un'ora e a 60° dopo 15 minuti. In una soluzione all'1% di acido carbolico muore in 5-15 minuti.
Patogenicità per gli animali e formazione di tossine. Alcune varietà di E. coli hanno proprietà patogene. La somministrazione parenterale di tali colture ad animali da laboratorio spesso provoca la morte di questi ultimi a causa dei sintomi della sepsi.
E. coli contiene endotossina. Esistono però dei bastoncelli che producono esotossine che agiscono sul sistema nervoso.
Malattie umane causate da Escherichia coli. L'Escherichia coli è un abitante permanente dell'intestino di una persona sana (principalmente nell'intestino crasso) ed è classificato come un microbo condizionatamente patogeno. In condizioni naturali svolge anche un ruolo positivo, essendo un antagonista della dissenteria, del tifo e di alcuni microbi putrefattivi. Nel corso della sua attività vitale, forma le vitamine B ed E. È stato stabilito che l'uso di alcuni antibiotici ad ampio spettro sopprime l'attività vitale di E. coli e porta a gravi disturbi intestinali. In determinate condizioni che causano una diminuzione della resistenza del macroorganismo (superlavoro, esaurimento, ecc.), questo microrganismo può causare varie malattie purulente dell'intestino (ad esempio appendicite) e delle vie urinarie. A volte provoca l'infiammazione dei dotti biliari e della cistifellea. Penetrando attraverso le ulcere intestinali durante la febbre tifoide e la dissenteria, l'E. coli può causare peritonite. È possibile che l'E. coli entri nel sangue attraverso la mucosa intestinale intatta, il che spiega le infezioni colibacillari.
Queste malattie hanno la natura dell'endoinfezione (autoinfezione) e non vengono trasmesse da malati a sani. Tuttavia, l’E. coli può causare malattie esogene. Questi sono i cosiddetti ceppi enteropatogeni di E. coli. Nelle loro proprietà morfologiche e biochimiche non sono diversi dall'E. coli ordinario, ma sono altamente patogeni per i bambini e sono più resistenti all'azione dei succhi gastrici e duodenali. La loro principale differenza è nella struttura antigenica, nella specificità del tipo. L'antigene O è inerente a tutte le varianti di Escherichia coli, l'antigene K di superficie si trova solo in quelle enteropatogene. L'identificazione degli antigeni K ha permesso di costruire uno schema diagnostico antigenico e, utilizzandolo, di dividere l'Escherichia coli enteropatogeno in un numero di tipi sierologici (0-25, 0-26, 0-55, 0-86, 0- 127, 0-128, ecc.). L'antigene K è strettamente specifico per ciascun sierotipo di Escherichia coli. Ad esempio, 0-26 ha “K”6, 0-11 ha “K”4, 0-55 ha “K”5, ecc. Attualmente esistono circa 40 E. coli enteropatogeni.
Gli Escherichia coli enteropatogeni causano gastroenterite e colienterite nei neonati e nei bambini piccoli, talvolta accompagnati da danni al fegato e significativa intossicazione. Le epidemie di tali malattie negli istituti per l'infanzia sono di natura da contatto o da contatto alimentare. Possono anche causare processi infiammatori purulenti e infezioni tossiche alimentari (intossicazione alimentare).
Diagnostica microbiologica. In caso di infezione endogena, il materiale inviato (bile, urina, secrezione uterina, ecc.) viene sottoposto ad esame batteriologico.
Il primo giorno. Semina del materiale su piastre con terreno Endo o Levin. I raccolti vengono posti in termostato per 24 ore a 37°.
Secondo giorno. Esame batterioscopico delle colonie rosse con tinta metallica o umide incolori. Se sono presenti piccoli bastoncini gram-negativi, ripiantarli su agar inclinato e metterli in termostato per 24 ore a 37°.
Il terzo giorno. Riseminazione di una coltura pura di batteri con carboidrati di una serie variegata: lattosio, glucosio, maltosio, mannitolo, saccarosio e brodo (per determinare l'indolo).
Quarto giorno. Contabilità del raccolto.
Una coltura che non decompone il lattosio e non forma indolo viene testata in una reazione di agglutinazione con sieri specifici di Salmonella. Se la reazione di agglutinazione dà esito negativo, il ceppo isolato deve essere considerato paracoliforme (E. paracoli).
La ricerca viene condotta in modo diverso per la gastroenterite e la colienterite nei bambini.
Il primo giorno. L'inoculazione di feci e vomito su piastre con terreno Endo o Levin viene mantenuta in termostato per 24 ore a 37°.
Secondo giorno. Almeno 10 colonie, rosse metalliche, rosa o incolori, vengono controllate utilizzando un test di agglutinazione indicativo con un siero OK agglutinante polivalente (contenente anticorpi contro diversi sierotipi di Escherichia coli). Il siero viene preparato miscelando sieri standard dei sierotipi di Escherichia coli più comunemente isolati. Una colonia agglutinata con siero polivalente viene testata con sieri monovalenti specifici per tipo con una diluizione di 1:10, cioè viene stabilito il sierotipo di Escherichia coli. Successivamente, della colonia che ha dato reazione di agglutinazione positiva, si effettua una subcoltura su agar inclinato e questa provetta viene posta in termostato per 24 ore a 37°. Se non si verifica l'agglutinazione dei batteri delle colonie, il risultato è negativo.
Il terzo giorno. La coltura sull'agar inclinato viene lavata via con soluzione salina sterile, il lavaggio viene trasferito in una provetta sterile e fatto bollire a bagnomaria per 1-2 ore. Con la coltura riscaldata si esegue una reazione di agglutinazione indicativa con il siero tipo-specifico che ha agglutinato i batteri allo stato vivo,
Se la reazione è positiva viene data una risposta indicativa, ad esempio:

ANALISI Numero di feci del bambino Petrov Sergei (6 mesi).
Durante l'esame batteriologico delle feci è stato isolato l'Escherichia coli patogeno (sierotipo 0-26).
Assistente di laboratorio
Si consiglia di completare lo studio con una reazione di agglutinazione dettagliata. I titoli degli antigeni O e K sono indicati sull'etichetta della fiala con siero agglutinante. Pertanto, il siero viene diluito in due file di provette. Per rilevare l'antigene K, una coltura viva lavata via da un agar inclinato viene aggiunta a una fila di provette; Per rilevare l'antigene O, viene utilizzata una coltura bollita per un'ora. L'ebollizione provoca la distruzione dell'antigene B, situato più superficialmente dell'antigene O. Le provette vengono poste in un termostato a 37° per un giorno. I ceppi omologhi al siero vengono agglutinati a un titolo o a mezzo titolo.
Terapia specifica. Per il trattamento dei processi infiammatori cronici causati da Escherichia coli sono indicati un autovaccino e un batteriofago. Recentemente è stato raccomandato l'uso di farmaci sulfamidici, streptomicina, cloramfenicolo, clortetraciclina, micerina, colimicina e neomicina.

STYLAB offre sistemi di test per la determinazione di Escherichia coli (E. coli) in campioni alimentari e ambientali utilizzando metodi microbiologici, PCR in tempo reale e agglutinazione al lattice.

Escherichia coli ( Escherichia coli) è un batterio anaerobico facoltativo gram-negativo mobile a forma di bastoncino che fa parte della normale microflora intestinale della maggior parte degli animali a sangue caldo, compreso l'uomo. Esistono molti sierotipi di E. coli, la maggior parte dei quali sono innocui o addirittura benefici per l'ospite. I batteri che compongono la microflora impediscono la proliferazione di altri batteri, compresi quelli patogeni. Inoltre, E. coli produce vitamina K. Tuttavia, alcuni sierotipi E. coli può causare gravi malattie. L'E. coli morfologicamente innocuo e patogeno non differisce, pertanto, per determinare la patogenicità di un microrganismo, è necessario analizzarne gli antigeni.

I batteri E. coli possono appartenere a diversi sierogruppi e avere antigeni diversi. Un sierogruppo è un gruppo di batteri che condividono un antigene comune; può includere più di un sierotipo, specie o genere. Per E. coli i più noti sono i sierogruppi enteropatogeni di E. coli O26, O55, O86, O111, O114, O119, O125, O126, O127, O128, O142 e O158. Questi stessi gruppi possono includere altri tipi di E. coli patogeni. Ad esempio, nel DAEC sono stati identificati i sierogruppi O86, O127, O142 e O158.

Esistono sei tipi di E. coli patogeni.

• Escherichia coli enteroemorragico (EHEC, abbreviato anche STEC per E. coli produttore della tossina Shiga e VTEC per E. Coli produttore di verotossina). Questi batteri producono due tossine chiamate tossine Shiga o simili a Shigella. L'EHEC provoca malattie con sintomi simili alla dissenteria e accompagnate da diarrea emorragica. Nei casi più gravi si può sviluppare la sindrome emolitica uremica (SEU). L'EHEC comprende i sierotipi di Escherichia coli O104:H4, O157:H7 e alcuni altri.
• L'Escherichia coli enterotossigeno (ETEC) produce tossine termolabili e termostabili, l'ultima delle quali è simile alla tossina Vibrio cholerae. Le malattie causate da questo batterio sono caratterizzate da diarrea acquosa, febbre e, in alcuni casi, nausea.
• L'Escherichia coli enteroinvasivo (EIEC) provoca malattie simili alla dissenteria bacillare. Questi batteri penetrano nelle cellule epiteliali intestinali e si moltiplicano in esse.
• L'Escherichia coli enteropatogeno (EPEC) provoca diarrea più spesso nei bambini che negli adulti. Il suo meccanismo d'azione è diverso da ETEC ed EIEC: questi batteri si attaccano alle cellule epiteliali intestinali, ma non vi penetrano. Le malattie causate dall’EPEC possono durare fino a 2 settimane.
• Anche l'Escherichia coli enteroaggregativo (EAEC) provoca malattie, soprattutto nei bambini. I batteri si attaccano all'epitelio intestinale e rilasciano tossine.
• L'Escherichia coli diffusamente aderente (DAEC) provoca lieve diarrea nei bambini, soprattutto quelli di età inferiore ai 2 anni. Tuttavia, questo microrganismo è stato trovato anche nei bambini sani, così come negli adulti sani.

L'Escherichia coli può causare non solo enteriti e infezioni tossiche, ma anche meningite nei neonati, infezioni respiratorie, infezioni del tratto urinario e batteriemia, un danno generale all'organismo causato da batteri che sono entrati nel sangue.

E. coliè uno degli organismi più studiati. Il genoma di un ceppo di questi batteri è stato completamente sequenziato nel 1997. L'Escherichia coli viene utilizzato negli esperimenti genetici e microbiologici, nonché nello studio della speciazione. Inoltre, con l'aiuto di questi batteri, vengono sintetizzate varie proteine, in particolare un analogo dell'insulina umana, alcuni enzimi, ecc. Vengono anche utilizzati per produrre vaccini. Sono in corso ricerche sull'uso dell'E. coli per produrre carburante.

Nella Federazione Russa e nei paesi dell'Unione doganale, il contenuto di E. coli nei prodotti alimentari è limitato da TR CU 021/2011 “Sulla sicurezza dei prodotti alimentari”, TR CU 033/2013 “Sulla sicurezza del latte e latticini” e altre norme tecniche. Le informazioni legislative attuali possono essere trovate sul sito web compatto24. com .

Per determinare l'E. coli nei campioni vengono utilizzati sia metodi microbiologici (terreni selettivi, substrati di test) sia la determinazione del DNA mediante PCR. Come test rapido viene utilizzato un metodo di agglutinazione al lattice semplice e veloce.

Letteratura

1. OK. Pozdeev. Microbiologia medica. Mosca, GEOTAR-MED, 2001.
2. Sito ufficiale del CDC.
3. Germani Y, Bégaud E, Duval P, Le Bouguénec C. Prevalenza di Escherichia coli enteropatogeno, enteroaggregativo e diffusamente aderente tra isolati da bambini con diarrea in Nuova Caledonia. J Infetta Dis. 1996 novembre;174(5):1124-6.
4. Mansan-Almeida R, Pereira AL, Giugliano LG. I ceppi di Escherichia coli diffusamente aderenti isolati da bambini e adulti costituiscono due popolazioni diverse. BMC Microbiol. 2013 febbraio 1;13:22.
5. Isabel C. A. Scaletsky, Sandra H. Fabbricotti, Rozane L. B. Carvalho, Claudia R. Nunes, Helcio S. Maranhão, Mauro B. Morais e Ulysses Fagundes-Neto Diffusamente aderenti Escherichia coli come causa di diarrea acuta nei bambini piccoli nel nord-est del Brasile: uno studio caso-controllo. J Clin Microbiol. febbraio 2002; 40(2): 645-648.