Rodzaj Eschenchia, gatunek E. coli, obejmuje oportunistyczną Escherichia coli (mieszkającą jelita ludzi, ssaków, ptaków, ryb i gadów) oraz warianty chorobotwórcze dla człowieka, różniące się między sobą budową antygenową, cechami patogenetycznymi i klinicznymi choroby, które powodują.

Morfologia. Pręciki w preparatach są ułożone losowo i są ruchome (okołotrychowe), ale zdarzają się też odmiany pozbawione wici. Wszystkie Escherichia mają fimbrie (pili).

Rozmnażają się w temperaturze 37°C i tworzą kolonie S i R na podłożu stałym. W płynnych mediach powodują zmętnienie, a następnie osad. Wiele szczepów ma kapsułkę lub mikrokapsułkę i tworzy kolonie śluzowe na pożywce.

Wytwarzają enzymy rozkładające węglowodany (do kwasu i gazu), białka i inne związki. Właściwości HD określa się przy różnicowaniu Escherichia od przedstawicieli innych rodzajów rodziny Enterobacteriaceae.

Antygeny. Najważniejszym z nich jest O-ANTIGEN, który stanowi podstawę podziału na serogrupy (ok. 170 O-serogrup). Wiele szczepów poszczególnych grup serologicznych ma wspólne antygeny z mikroorganizmami z innych grup serologicznych Escherichia, a także z Shigella, Salmonella i innymi enterobakteriami.

Antygeny K w Escherichia składają się z 3 antygenów - B- i L-Ar termolabilny, niszczony przez gotowanie; A-Ag termostabilny, inaktywowany w temperaturze 120°C. W Escherichia znanych jest około 97 serotypów antygenów K.

Antygeny H są specyficzne dla typu i charakteryzują serotyp w obrębie grup O. Opisano ponad 50 różnych antygenów H.

Strukturę AG pojedynczego szczepu Escherichia scharakteryzowano wzorem (oznaczenia alfanumeryczne O-, K- i H-AG): E. coli O26:K60(B6):H2

Ekologia i dystrybucja. Są stale wydalane z kałem do środowiska. Zachowują żywotność w wodzie i glebie przez kilka miesięcy, ale szybko giną pod wpływem środków dezynfekcyjnych i po podgrzaniu.

Patogeny oportunistyczne mogą powodować procesy ropno-zapalne, zapalenie miedniczek, zapalenie pęcherza moczowego, zapalenie pęcherzyka żółciowego itp. (kolibakterioza). W przypadku ciężkiego niedoboru odporności może wystąpić sepsa coli. Ropienie rany rozwija się również jako infekcja egzogenna, często w połączeniu z innymi mikroorganizmami.

Patogenne powodują ostre choroby jelit - escherichiozę - infekcje egzogenne. Źródłem są pacjenci lub nosiciele bakterii, drogą przenoszenia jest pokarm. Dzieci chorują częściej.

Patogeneza. Oportunistyczna Escherichia coli uszkadza komórki i tkanki pod wpływem endotoksyny, która jest uwalniana po śmierci mikroorganizmów. Escherichia ma zestaw różnych czynników chorobotwórczych. Wśród czynników sprawczych escherichiozy są enteropatogenne (umiarkowanie inwazyjne), enterotoksyczne i enteroinwazyjne coli. Różnią się one budową antygenową i powodują choroby jelit specyficzne dla każdego wariantu uprawy.

Mają fimbrie, które zapewniają przyłączenie mikroorganizmów do komórek nabłonkowych. Adhezyny fimbrii rozpoznają komplementarne receptory komórkowe: uropatogenne – P-fimbrie (przyczepiają się do nabłonka dróg moczowych), szczepy enterotoksyczne przyczepiają się do kosmków nabłonkowych w jelicie cienkim i kolonizują je. Biegunka i hiperkineza rozwijają się w wyniku działania enterotoksyn (termolabilnych i termostabilnych), co objawia się nadmiernym wydzielaniem nabłonka, odrzuceniem obrzękniętych kosmków bez rozwoju reakcji zapalnej.

Enteropatogenne szczepy o umiarkowanej inwazyjności kolonizują nabłonek jelito cienkie w tym przypadku powierzchnia nabłonka zostaje uszkodzona, mikrokosmki zostają odrzucone i następuje erozja. Pojedyncze bakterie wnikają do cytoplazmy komórek nabłonkowych, makrofagów i leukocytów, powodując bakteriemię (po zniszczeniu fagocytowanych komórek).

Enteroinwazyjne szczepy adsorbowane są na powierzchni komórek nabłonkowych błony śluzowej okrężnica, przenikają do komórek nabłonkowych i namnażają się w ich cytoplazmie. Komórki obumierają i pojawia się wrzodziejące zapalenie nieżytowe. Klinicznie – zespół podobny do czerwonki.

Patogenna Escherichia często wytwarza hemolizyny. W patogenezie escherichiozy rolę odgrywają endotoksyny i polisacharydy antygenu K, białko T, które hamują aktywność dopełniacza, fagocytozę, hamując opsoniny.

Odporność. Kolibakterioza występuje w stanach niedoborów odporności. Powrót do zdrowia ułatwia aktywacja nieswoistych czynników ochronnych. Odporność nie rozwija się po chorobie.

Naturalną odporność na zapalenie okrężnicy u małych dzieci zapewniają: a) bifidumbakterie (antagoniści, kolonizują nabłonek przewodu pokarmowego z prawidłowo ukształtowaną biocenozą jelitową); b) przeciwciała mleka matki, które zawiera również substancje stymulujące rozwój bifidumflory.

Przeciwciała surowicy przeciwko enteropatogennym szczepom Escherichia (IgM) nie przenikają przez łożysko, dlatego ten mechanizm ochrony przed infekcjami coli u małych dzieci nie działa. Odporność na escherichiozę przypominającą czerwonkę przekazywana jest dziecku przez matkę poprzez przeciwciała IgG przechodzące przez łożysko. Dlatego małe dzieci nie są podatne na escherichiozę przypominającą czerwonkę (i czerwonkę), ale łatwo zapadają na zapalenie jelita grubego w przypadku zakażenia enteropatogenną escherichią.

Z SIgA wiąże się powstawanie miejscowej odporności jelitowej u dzieci i dorosłych. Po cierpieniu na escherichiozę pozostaje specyficzna dla grupy, słabo wyrażona odporność. Możliwe są choroby nawracające.

Diagnostyka laboratoryjna. Patogenne serotypy Escherichia coli izoluje się z kału, wymiocin, ropy, wydzieliny z błony śluzowej gardła i nosa, a w przypadku sepsy – z krwi.

Badaniu na obecność Escherichia poddaje się także wodę z płukania żołądka, popłuczyny rąk personelu obsługi, powietrze w pomieszczeniu i resztki jedzenia w przypadku zakażenia toksycznego. Materiały (z wyłączeniem krwi) nanosi się na podłoże Endo i umieszcza w termostacie o temperaturze 37°C. Po 18–24 godzinach inkubacji w termostacie wybiera się z tego podłoża czerwone kolonie Escherichia dodatnie pod względem laktozy i aglutynuje na szkle w wieloważnej surowicy OK zawierającej przeciwciała przeciwko 22 serotypom enteropatogennej Escherichia coli (EPEC). Jeżeli reakcja aglutynacji jest dodatnia, kolonie przesiewa się na skośny agar, a następnego dnia wyizolowaną hodowlę aglutynuje się w surowicach poliwalentnych z mniejszym zestawem przeciwciał, a następnie w każdym z tych, które wchodziły w skład mieszaniny, która spowodowała aglutynację izolowana Escherichia. Na końcowym etapie identyfikacji serologicznej EPKP przeprowadza się szczegółowy test aglutynacji w określonej surowicy. W tym celu surowicę diagnostyczną rozcieńcza się w dwóch rzędach probówek do miana wskazanego na etykiecie ampułki. W jednym z nich dodaje się podgrzaną kulturę wypłukaną ze skośnego agaru, w drugim - jego przegotowaną zawiesinę. Probówki umieszcza się w termostacie w temperaturze 37°C na 24 godziny. Szczepy ECP homologiczne do surowicy muszą aglutynować w niej do co najmniej połowy miana.

Hodowlę, która dała pozytywną szczegółową reakcję aglutynacji, wysiewa się na pożywki serii Hiss w celu zbadania jej właściwości sacharyrolitycznych i proteolitycznych.

Zapobieganie i leczenie. Przestrzeganie zasad sanitarno-higienicznych, identyfikacja pacjentów i nosicieli. Nie opracowano specyficznej profilaktyki W leczeniu chorób wywoływanych przez E. coli stosuje się preparaty biologiczne z drobnoustrojów antagonistycznych - bifidumbakteryna, laktobakteryna.

E. coli są wrażliwe na wiele antybiotyków, ale w ostatnich latach liczba szczepów opornych na antybiotyki wzrosła w wyniku przeniesienia plazmidów R.

15. Yersinia. Diagnostyka laboratoryjna pseudotuberkulozy i jersiniozy jelitowej, dżumy.

Rodzaj Yersinia Rodzaj obejmuje 11 gatunków. Y.pestis powoduje zarazę Y.pseudotuberkuleza- pseudotuberkuloza, Y. enterocolitica- jersinioza (jelitowa), wiele gatunków nie jest chorobotwórczych ani oportunistycznych dla człowieka.

Morfologia. Częściej mają postać jajowatą (cocco-bacillary), są wybarwione dwubiegunowo i mają skłonność do polimorfizmu. Większość gatunków jest ruchliwa w temperaturach poniżej +30 stopni Celsjusza (posiada wici peritrichous), jest gram-ujemna i ma substancję otoczkową. Y.pestis są nieruchome i mają kapsułkę.

Właściwości kulturowe i biochemiczne.

Fakultatywne beztlenowce. Optymalna temperatura wynosi od +25 do + 28 stopni Celsjusza, pH jest zbliżone do neutralnego. Dobrze rosną na prostych pożywkach. Większość węglowodanów ulega fermentacji bez wytwarzania gazu. Yersinia jest w stanie zmieniać swój metabolizm w zależności od temperatury i rozmnażać się w niskich temperaturach ( właściwości psychrofilne). Zjadliwe szczepy tworzą kolonie szorstkie (R), formy przejściowe (RS) i szarawo-śluzowo-gładkie (S).

Badając kolonie drobnoustroju dżumy, rozróżnia się dwa typy kolonii - młode i dojrzałe. Młode mikrokolonie o nierównych krawędziach (etap „tłuczonego szkła”) następnie łączą się, tworząc delikatne płaskie formacje z ząbkowanymi krawędziami (etap „koronkowej chusteczki”). Dojrzałe kolonie są duże, z brązowym, ziarnistym środkiem i postrzępionymi krawędziami („stokrotki”). Wiele szczepów jest w stanie redukować barwniki, które powodują przebarwienia (błękit metylenowy, indygo itp.). Na skośnym agarze po dwóch dniach w temperaturze +28 C tworzy się szarawo-biały nalot, wrastający w podłoże; na bulionie tworzy się delikatny film powierzchniowy i tworzy się osad przypominający bawełnę. Temperatura +37°C jest selektywna dla tworzenia się torebki u Y. pestis. Kultury Y. pseudotuberculosis i Y. enterocolitica nie posiadają stadium „tłuczonego szkła”, początkowo są małe, błyszczące, wypukłe, później może nastąpić zlewny wzrost. obserwowane przy tworzeniu wypukłych, bulwiastych kolonii, podobnych do kolonii Y.pestis. Rosną na uniwersalnych pożywkach (pożywka Endo, agar Mac Conkeya, pożywka Serowa itp.) w połączeniu z metodami akumulacji w zimnych warunkach.

Struktura antygenowa. Wszystkie typy Yersinia mają antygen O (endotoksynę), podobny do antygenów O innych bakterii Gram-ujemnych i toksyczny dla ludzi i zwierząt. Kompleksy lipopolisacharydowo-białkowe O - antygenów Yersinia dzielą się na S (gładkie) i R (szorstkie), przy czym ten ostatni jest powszechny dla Y. pestis i Y. pseudotuberculosis. Y. enterocolitica ma antygen powierzchniowy wspólny dla innych enterobakterii. Czynnik sprawczy pseudotuberkulozy dzieli się na 13 serotypów w oparciu o antygeny O i H, częściej występują serotypy I, III i IV, jersiniozę dzieli się na. Wyizolowano 34 serotypy oparte na antygenie O, najczęściej pochodzące od człowieka. Izolowane są serotypy O3 i O9. W temperaturach od +22 do +25°C Y.pseudotuberculosis i Y.enterocolitica posiadają antygen wiciowy, a w temperaturze +37°C tracą antygen H i ruchliwość.

Y. pestis jest bardziej jednorodny antygenowo, posiada antygen otoczkowy (frakcja I), antygeny T, V - W, białka plazmakoagulazy, fibrynolizynę, błonę zewnętrzną itp. Dżuma wydziela bakteriocyny (pestycyny), które mają działanie bakteriobójcze na organizmy drobnoustroju pseudotuberkulozy i szczepów coli.

Właściwości patogenne. Czynnik wywołujący dżumę ma największy potencjał chorobotwórczy wśród bakterii. Tłumi funkcje układu fagocytarnego, ponieważ tłumi wybuch oksydacyjny w fagocytach i rozmnaża się w nich bez przeszkód. Czynniki patogeniczności są kontrolowane przez trzy klasy plazmidów. W patogenezie wyróżnia się trzy główne etapy - wprowadzenie limfogenne, bakteriemia, uogólniona posocznica. Czynnikami sprawczymi pseudogruźlicy i jersiniozy są adhezyny i inwazyny, białka o niskiej masie cząsteczkowej (hamujące czynniki bakteriobójcze) i enterotoksyna. Niektóre czynniki są kontrolowane przez plazmidy zjadliwości.

Cechy kliniczne. Dżuma najczęściej występuje w postaci dymieniczej, płucnej i jelitowej. Najbardziej niebezpieczni są pacjenci z dżumą płucną, którzy wydzielają ogromne ilości patogenu w swojej plwocinie).

Jersinioza i pseudotuberkuloza to infekcje jelitowe. Obraz kliniczny jest zróżnicowany - regionalna limfadenopatia (imitująca zapalenie wyrostka robaczkowego), zapalenie jelit, reaktywne zapalenie stawów, zesztywniające zapalenie stawów kręgosłupa, szkarlatyna.

Cechy epidemiologiczne.

Dżuma to klasyczna naturalna ogniskowa choroba odzwierzęca dzikich zwierząt. Głównymi nosicielami w przyrodzie są świstaki, susły, myszoskoczki, piki, a w warunkach antropourgicznych (miejskich) – szczury (plaga miast portowych). Podczas przenoszenia patogenu, zwłaszcza na obszarach, gdzie przeważają zwierzęta nie hibernujące, pchły zwierzęce mogą atakować i zakażać ludzi. W przypadku ognisk piaszczystych wielbłądy mogą zostać zarażone i stanowić ryzyko epidemiczne.

Pseudotuberkuloza i jersinioza jelitowa przenoszone są w naturze przez gryzonie. Można je długo przechowywać, a nawet kumulować w niskich temperaturach, na przykład w sklepach warzywnych. Może powodować choroby u zwierząt hodowlanych. Na człowieka przenoszą się głównie poprzez produkty spożywcze pochodzenia zwierzęcego, a także pochodzenia roślinnego.

Diagnostyka laboratoryjna. Diagnostykę bakteriologiczną dżumy mogą przeprowadzać wyłącznie specjalistyczne laboratoria stacji i instytutów przeciwdżumowych (1 grupa chorobotwórczości). Metody ekspresyjnego wykrywania antygenu to MFA, RPGA z diagnostyką erytrocytów, uczulonych przeciwciałami monoklonalnymi przeciwko antygenowi otoczkowemu, ELISA, RNAT. Do diagnostyki serologicznej można zastosować testy ELISA, RNAG, ELISA.

Podczas diagnostyki bakteriologicznej jersiniozy jelitowej i rzekomej gruźlicy, ze względu na kumulację patogenu w niskich temperaturach (w przeciwieństwie do większości innych mikroorganizmów), materiał najpierw przenosi się do buforowanego roztworu soli fizjologicznej i przechowuje w lodówce z okresowymi inokulacjami na Endo, Ploskirev, i media Serowa. Podejrzane kolonie są hodowane w celu uzyskania czystych kultur, badane pod kątem ich właściwości biochemicznych i identyfikowane w RZS za pomocą surowic diagnostycznych. Do diagnostyki serologicznej wykorzystuje się RA i RNGA (w przypadku rzekomej gruźlicy – ​​z serotypem I, w przypadku jersiniozy – z serotypami O3 i O9) za pomocą serotypu O3 i O9. badanie próbek pobranych w dynamice procesu zakaźnego sparowanych surowic.

Specyficzna profilaktyka. Stosowany podczas epidemii dżumy. Stosuje się żywą, atenuowaną szczepionkę ze szczepu EV. Dostępna jest szczepionka w postaci suchych tabletek do stosowania doustnego. Do oceny odporności na dżumę (naturalną poinfekcyjną i szczepionkową) należy wykonać śródskórny test alergiczny pestyna.

Rodzaj ten jest reprezentowany tylko przez jeden gatunek bakterii - E. coli, ale ma wiele odmian. Odmiany E. coli różnią się właściwościami biologicznymi, mogą mieć różne zestawy enzymów (biotypy) i różne struktury antygenowe (serotypy).

Escherichia coli została po raz pierwszy wyizolowana w 1888 roku przez Eschericha z ludzkich odchodów i nazwana jego imieniem.

Naturalnym środowiskiem E. coli są jelita człowieka. Escherichia coli jest przedstawicielem prawidłowej mikroflory jelitowej.

W ciągu swojego życia E. coli wytwarza enzymy wspomagające trawienie (np. rozkładające błonnik) i syntetyzuje niektóre witaminy (np. witaminy z grupy B). Ponadto bakterie te wykazują działanie antagonistyczne wobec mikroorganizmów chorobotwórczych, takich jak patogeny czerwonki, duru brzusznego i infekcji toksycznych. Brak E. coli w jelicie grubym prowadzi do poważnej choroby - dysbiozy. W tym przypadku normalny skład mikroflory jelitowej zostaje zakłócony, rozwijają się Proteus, flora kokosowa, grzyby itp.

Kiedy odporność organizmu spada (głód, przepracowanie itp.), Escherichia może przenikać do innych narządów i tkanek i powodować poważne procesy patologiczne. Można zatem uznać, że Escherichia to typowe mikroorganizmy oportunistyczne: w normalnych warunkach są saprofitami, a przy zmianie warunków powodują choroby.

Wydalana z kałem E. coli przedostaje się do środowiska zewnętrznego. Wykrycie E. coli w glebie, wodzie i innych przedmiotach wskazuje na ich skażenie odchodami, a oznaczenie ilości E. coli (miano coli, wskaźnik coli) charakteryzuje stan sanitarny obiektu (patrz „Mikrobiologia sanitarna”).

Morfologia. E. coli to krótkie pałeczki, średnio o wymiarach 0,5–3,0 × 0,5–0,8 µm. Gram-ujemne. W większości przypadków są mobilne, peritrichous. Jednakże niektóre warianty E. coli są nieruchliwe. Wiele szczepów tworzy kapsułkę. Nie ma sporu.

Uprawa. Escherichia coli jest fakultatywnym beztlenowcem. Dobrze rośnie na prostych pożywkach w temperaturze 37° C i pH 7,2-7,8. Szczepy E. coli izolowane z jelit ludzi i zwierząt rozwijają się w temperaturze 43-45°C, a E. coli zwierząt zimnokrwistych nie rozmnaża się w tych warunkach. Ta różnica we właściwościach E. coli różnego pochodzenia służy do określenia stanu sanitarnego obiektu, ponieważ dopiero wykrycie stałocieplnej E. coli wskazuje na problem sanitarny.

Na MPA E. coli tworzy mętne, lekko wypukłe, wilgotne kolonie o gładkiej krawędzi. Na MPB daje równomierne zmętnienie. Kultury posiadające torebkę rosną w postaci kolonii śluzowych.

Do identyfikacji Escherichia stosuje się podłoża do diagnostyki różnicowej: agar endo i eozyny z błękitem metylenowym (EMB). Na podłożu Endo E. coli rośnie w postaci szkarłatno-czerwonych kolonii z metalicznym połyskiem lub bez. Na podłożu EMS - w postaci ciemnofioletowych kolonii.

Właściwości enzymatyczne. E. coli mają znaczną aktywność enzymatyczną. Rozkładają laktozę, glukozę, mannitol, maltozę, sacharozę i inne węglowodany i alkohole, tworząc kwas i gaz. Właściwości lroteolityczne: forma indolowa. Żelatyna nie ulega rozkładowi. Niektóre biowary nie fermentują laktozy i sacharozy (Tabela 29).

Uwaga, kg - tworzenie kwasu i gazu; + obecność znaku; - brak znaku.

Toksyczność. Escherichia zawierają endotoksynę (liggopolisacharyd).

Struktura antygenowa. Escherichia różnią się strukturą antygenową komórki drobnoustroju, co stanowi podstawę klasyfikacji bakterii tego rodzaju. Istnieją trzy typy antygenów Escherichia: antygen O (somatyczny), antygen K (torebkowy) i antygen H (wiciowy). Termostabilny antygen O jest kompleksem lipopolisacharydowo-białkowym i znajduje się w ścianie komórkowej bakterii. Antygen O określa, czy kultura należy do grupy serologicznej. Opisano ponad 170 takich grup. Niektóre składniki antygenu O są wspólne dla różnych grup O Escherichia, a czasami dla innych enterobakterii (Shigella, Salmonella itp.). Antygeny K Escherichia są różne: A, B, L i M. Antygeny A i M są termostabilne, B i L są termolabilne. Antygen K jest zlokalizowany bardziej powierzchownie w komórce drobnoustroju niż antygen O, dlatego w jego obecności nie zachodzi reakcja aglutynacji żywej kultury z surowicą O. Aby wykryć antygen O, hodowlę ogrzewa się przez godzinę w temperaturze 100 ° C: antygen K ulega zniszczeniu podczas ogrzewania, a antygen O staje się zdolny do interakcji z surowicą. Ustalono, że Escherichia ma około 100 typów antygenów K, głównie antygeny typu B (labilne termicznie). Antygen H występuje tylko w szczepach ruchliwych, ponieważ jest powiązany z wiciami. W Escherichia znanych jest ponad 50 typów antygenu H. Oznaczenie antygenu H umożliwia ustalenie serowarianta wyizolowanej hodowli (ryc. 40).

Charakterystykę składu antygenowego wyizolowanej kultury Escherichia podano na podstawie wyników reakcji aglutynacji z surowicami zawierającymi przeciwciała O-, K- i H. Jednocześnie określa się, jakie antygeny występują w hodowli, a ich kombinacja charakteryzuje formułę antygenową wyizolowanej hodowli, czyli jej serowariant. Tabela 30 przedstawia przykłady struktury antygenowej niektórych serotypów E. coli, w których antygeny K są antygenami B.

Jeżeli hodowla uległa aglutynacji z surowicą OK OP1:K58 (B4) i surowicą H „6”, wówczas wyizolowano serowariant E. coli O111:B4:H6; jeżeli zostanie stwierdzona reakcja aglutynacji z surowicą OK O26:K60 (B6) i surowicą H „11”, izolowana jest kultura E. coli 026:B6:H11 itp.

Oprócz określenia serowarianta E. coli możliwe jest również określenie fagowaru wyizolowanej kultury. Istnieją zestawy bakteriofagów, które lizują Escherichia poszczególnych grup serologicznych. W wyniku lizy kultury jeden z fagów ustanawia swój fagowar. Identyfikacja produktów fagowych ma znaczenie epidemiologiczne.

Antagonistyczne działanie E. coli i ich zdolność do hamowania wzrostu bakterii gnilnych i chorobotwórczych wykorzystuje się do tworzenia preparatów bakteryjnych do leczenia dysbiozy i różnych chorób jelit (kolibakteryna, bifikol).

Odporność na czynniki środowiskowe. E. coli jest dość odporna. W 55°C giną w ciągu godziny, w 60°C – w ciągu 15 minut. W glebie i wodzie pozostają do 2-3 miesięcy, w mleku nie tylko przeżywają, ale także rozmnażają się. Roztwory środków dezynfekcyjnych (3% chloramina, roztwór rtęci 1:1000 itp.) zabijają je w ciągu 20-30 minut. E. coli jest szczególnie wrażliwa na działanie jaskrawej zieleni.

Wrażliwość zwierząt. Escherichia niektórych serogrup jest patogenna dla różnych zwierząt i powoduje u nich choroby żołądkowo-jelitowe. Spośród zwierząt laboratoryjnych najbardziej wrażliwe na E. coli są świnki morskie, króliki i białe myszy. W zależności od sposobu podawania, kultura E. coli powoduje różne procesy patologiczne: zapalenie i ropień przy wstrzyknięciach podskórnych, zapalenie otrzewnej i posocznicę po podaniu dootrzewnowym i dożylnym.

Źródła infekcji. Chory człowiek. W tym przypadku bakterie dostają się do organizmu ze środowiska zewnętrznego (infekcja egzogenna). E. coli może również powodować rozwój procesu patologicznego „od wewnątrz” (infekcja endogenna).

Drogi transmisji. Główną drogą przenoszenia egzogennej postaci zakażenia jest kontakt domowy (kontakt pośredni). Patogeny mogą być przenoszone na brudnych rękach, poprzez naczynia, zabawki, bieliznę, żywność, muchy.

Patogeneza. Choroby wywołane przez Escherichia nazywane są escherichiozą. Rozwój escherichiozy zależy od drogi wprowadzenia patogenu do organizmu oraz od grupy serologicznej, do której należy patogen. Kiedy bakterie dostaną się przez usta, mogą wystąpić choroby jelit u dzieci i dorosłych. Niektóre Escherichia z grupy O (serovar) są najczęstszymi patogenami chorób człowieka. Takie bakterie nazywane są enteropatogenną Escherichia coli (EPEC). Obecnie znanych jest wiele wariantów ECP powodujących różny przebieg escherichiozy. Istnieje kilka grup ECP:

grupa I - czynniki wywołujące zapalenie okrężnicy i jelit u małych dzieci (serogrupy O111, O26, O55, O86 itp.);

grupa II - czynniki wywołujące choroby czerwonkowe u dzieci i dorosłych (O25, O124, O143, O144 itp.);

grupa III - czynniki wywołujące choroby choleropodobne (O1, O5, O6, O78 itp.).

Znajdująca się w produktach spożywczych E. coli może się w nich rozmnażać. Spożywanie takich produktów prowadzi do rozwoju toksycznej infekcji przenoszonej przez żywność.

Rozwój infekcji endogennej prowadzi do uszkodzenia różnych narządów: zapalenie pęcherzyka żółciowego (zapalenie pęcherzyka żółciowego), pęcherza (zapalenie pęcherza moczowego), zatrucie krwi (posocznica) itp.

Odporność. Odporność rozwija się tylko przeciwko jednemu serowariantowi Escherichia - czynnikowi wywołującemu tę chorobę. Różnorodność Escherichia sprawia, że ​​odporność ta jest praktycznie nieskuteczna. W rozwoju stanu odporności u chorych dzieci duże znaczenie ma wytwarzanie przeciwciał IgM, które nie przenikają przez łożysko i dlatego nie są przenoszone przez matkę. Przeciwciała IgA przeciwko Escherichia przenoszone są na dziecko przez matkę poprzez mleko matki.

Zapobieganie. Utrzymywanie higieny osobistej i warunków sanitarnych. Nie ma specyficznej profilaktyki.

Leczenie. Antybiotyki: ampicylina, tetracyklina itp. Obecnie produkowany jest fag coliproteus, którego zastosowanie daje dobre rezultaty.

Pytania kontrolne

1. Jakie są główne cechy bakterii z rodziny jelitowej?

2. Jakie antygeny ma Escherichia?

3. Jakie preparaty lecznicze przygotowuje się z E. coli?

Badanie mikrobiologiczne

Cel pracy: izolacja i identyfikacja EPC.

Materiał do badań

1. Ruchy jelit.

2. Wymioty.

W razie potrzeby bada wydzielinę z nosa i gardła, ropę z ucha, krew, mocz, fragmenty narządów zwłok.

W przypadku wystąpienia ogniska zapalenia jelita grubego badane są produkty spożywcze, płyny do mycia rąk obsługi, zabawki i inne przedmioty (zgodnie ze wskazaniami epidemiologicznymi).

Notatka. Im wcześniej zbada się kał od początku choroby, tym większe jest prawdopodobieństwo wyizolowania patogenu.

Główna metoda badawcza

Bakteriologiczny

Postęp badania

Drugi dzień nauki

Wyjmij zasiane dzień wcześniej kubki z termostatu i obejrzyj je w świetle padającym lub przechodzącym. Jeżeli na podłożu Endo znajdują się szkarłatno-czerwone kolonie (z metalicznym połyskiem lub bez) lub fioletowe kolonie na podłożu EMS, przeprowadza się testową reakcję aglutynacji na szkle w celu odróżnienia EPC od innych odmian Escherichia.

Aby przeprowadzić testową reakcję aglutynacji, wybiera się co najmniej 10 izolowanych kolonii, zaznaczając je lub numerując z tyłu szalki; część każdej docelowej kolonii usuwa się za pomocą ezy i aglutynuje w kropli surowicy poliwalentnej lub immunoglobuliny. Badana jest tylko część kolonii, aby w przypadku pozytywnej reakcji aglutynacji można było wyizolować czystą kulturę od reszty kolonii.

Standardowe lub wieloważne surowice Escherichia (lub immunoglobuliny) przygotowywane są w warunkach przemysłowych. Poliwalentne surowice OK Escherichia (lub immunoglobuliny OK) zawierają przeciwciała przeciwko kilku antygenom O i K Escherichia. Za ich pomocą w przybliżeniu określa się przynależność wybranej kultury do EPKP. Na przykład wieloważna surowica O26, O55, O111 umożliwia identyfikację kultur Escherichia o tej samej nazwie. Serum rozcieńcza się zgodnie ze wskazówkami na etykiecie.

W laboratorium można przygotować mieszaninę pojedynczych surowic OK, łącząc nie więcej niż 5 surowic, tak aby rozcieńczenie każdej z nich nie było większe niż 1:10.

Ustawianie testowej reakcji aglutynacji. Nanieść 10 kropli surowicy wieloważnej (lub immunoglobuliny) na jeden lub dwa dobrze odtłuszczone szkiełka. Do każdej kropli dodaj porcję zamierzonej kolonii i zmiel ją. Kolonie, które dały reakcję aglutynacji, przesiewa się do probówek ze skośnym agarem i umieszcza w termostacie na 18-20 godzin. Jeżeli żadna z 10 kolonii nie wykazała reakcji aglutynacji, udzielana jest odpowiedź negatywna.

Trzeci dzień nauki

Wyjmij plony z termostatu i sprawdź je. Na MPA enteropatogenna E. coli tworzy zwykle wilgotną, błyszczącą, szarawą powłokę, rzadziej jest mętna. Hodowlę wyhodowaną na skośnym agarze bada się ponownie w reakcji aglutynacji szkła z poliwalentnymi surowicami Escherichia (lub immunoglobulinami). Jeżeli wyizolowana kultura wykazuje reakcję aglutynacji z surowicą wieloważną (immunoglobuliną), wówczas aglutynuje się ją z każdą surowicą wzorcową (immunoglobuliną) oddzielnie w rozcieńczeniu 1:5 - 1:10. Aglutynacja z żywą kulturą ma charakter orientacyjny.

Następnie należy potwierdzić przynależność wybranej kultury do rodzaju Escherichia za pomocą testów biologicznych. W tym celu hodowlę wysiewa się na półpłynną pożywkę Hiss z laktozą, glukozą, mannitolem, sacharozą, maltozą i innymi cukrami, a także na bulionie lub wodzie peptonowej w celu określenia powstawania indolu i siarkowodoru. W tym celu do probówek pod korkiem zanurza się dwie bibuły wskaźnikowe zwilżone odczynnikami wykrywającymi powstawanie tych substancji. Jedna kartka papieru zmienia kolor na czerwony w obecności indolu, druga staje się czarna w obecności siarkowodoru.

Podczas fermentacji cukrów odczyn podłoża staje się kwaśny i zmienia się kolor wskaźnika. Jeśli oprócz kwasu wytworzy się gaz, w ośrodku pojawią się pęcherzyki. Jednocześnie określa się ruchliwość bakterii: zaszczepia się je na półpłynnym (0,2%) agarze przez nakłucie. Bakterie mobilne powodują zmętnienie całego środowiska, natomiast bakterie nieruchome rozwijają się dopiero po ukłuciu.

W celu ostatecznej identyfikacji wyizolowanej kultury przeprowadza się szczegółową reakcję aglutynacji z kulturami żywymi i ogrzewanymi: z żywymi - w celu oznaczenia antygenu K, z ogrzanymi - w celu określenia antygenu O. Aby przeprowadzić szczegółową reakcję aglutynacji, antygen przygotowuje się w następujący sposób: 3-5 ml izotonicznego roztworu chlorku sodu zmywa się hodowlę ze skosu agarowego. Powstałą zawiesinę wlewa się do dwóch probówek. Jeden z nich ogrzewa się w łaźni wodnej w temperaturze 100°C przez godzinę.

Szczegółową reakcję aglutynacji przeprowadza się w dwóch rzędach probówek. Surowicę w obu rzędach rozcieńcza się w stosunku 1:50 - 1:100 (w pierwszej probówce) do miana wskazanego na etykiecie ampułki surowicy. Dodaj 2 krople żywej kultury do pierwszego rzędu i 2 krople podgrzanej kultury do drugiego rzędu.

Probówki wytrząsa się i umieszcza w termostacie na 18-24 godziny.

Czwarty dzień badań

Uwzględnia się zmiany w ośrodku Hissa i rejestruje powstawanie indolu i siarkowodoru.

Większość przedstawicieli Escherichia fermentuje węglowodany, tworząc kwas i gaz, oraz rozkłada białkowy substrat odżywczy, tworząc indol.

Reakcję aglutynacji w probówce rejestruje się za pomocą szkła powiększającego lub aglutynoskopu. Aglutynacja z żywą kulturą jest gruboziarnista, z martwą kulturą drobnoziarnista. Reakcję uznaje się za pozytywną, jeśli aglutynację z ogrzaną kulturą obserwuje się w surowicy rozcieńczonej co najmniej o połowę miana surowicy, a żywą hodowlę aglutynuje się z surowicą rozcieńczoną co najmniej 1:200. Stosunek przeciwciał do ogrzanych i żywych kultur również odgrywa rolę. Rozcieńczenie surowicy, w której stwierdza się aglutynację z ogrzaną kulturą, musi być co najmniej 2-krotnie większe niż rozcieńczenie surowicy, w której stwierdza się aglutynację żywej kultury. W tabeli 31 przedstawia różne opcje wyniku reakcji aglutynacji.

Notatka. Możliwe są trzy warianty reakcji: 1) podgrzana kultura aglutynuje surowicą w wyższych rozcieńczeniach niż żywa, reakcja jest pozytywna; 2) żywe i ogrzane kultury powodują aglutynację w równych rozcieńczeniach surowicy. Wynik ten może wskazywać na brak antygenu K w hodowli; aglutynacja żywych i ogrzanych kultur jest spowodowana antygenem O. W takich przypadkach konieczne jest powtórzenie reakcji aglutynacji; 3) aglutynacja żywej kultury przy braku aglutynacji u Grety pozwala na udzielenie odpowiedzi negatywnej. Oczywiście w hodowli nie ma antygenu O odpowiadającego przeciwciałom O w surowicy (ryc. 41).

Pytania kontrolne

1. Jaki materiał jest badany w celu izolacji Escherichia?

2. Jakimi surowicami można różnicować EPKP?

3. Dlaczego przeprowadza się szczegółową reakcję aglutynacji z żywymi i ogrzanymi kulturami Escherichia?

1. Pobrać od nauczyciela płytki Petriego z kulturą zaszczepioną na podłożu Endo i podhodowlę do probówki ze skośnym agarem.

2. Pobrać od nauczyciela kulturę EPC na skosie agarowym, przepłukać izotonicznym roztworem chlorku sodu. Część popłuczyny podgrzać w łaźni wodnej o temperaturze 100°C. Surowicę rozcieńczyć w dwóch rzędach probówek i przeprowadzić reakcję aglutynacji jak opisano powyżej.

Media kulturowe

Podłoża różnicowe Endo i EMS służą do hodowli bakterii jelitowych. Dostępny w postaci suchego proszku. Zgodnie z instrukcją na etykiecie odważyć odpowiednią ilość suchego podłoża, rozpuścić w odpowiedniej ilości wody, zagotować, wymieszać i rozlać do sterylnych szalek Petriego.

Czy w Twoim życiu prywatnym jest pustka? Nie masz zwykłej dziewczyny? To uwodzicielskie dziwki, które dadzą każdą okazję do zaspokojenia Twoich potrzeb seksualnych w uroczy sposób.

Escherichia jako czynnik etiologiczny zakażeń szpitalnych.

Zakażenia szpitalne, zwane także zakażeniami szpitalnymi, są ważną przyczyną zachorowalności i śmiertelności. Określa się je jako zakażenia, które występują u pacjentów po przyjęciu do placówki medycznej, pod warunkiem, że w chwili przyjęcia pacjent nie miał objawów klinicznych tego zakażenia i nie znajdował się w okresie inkubacji. Do tej kategorii zaliczają się także infekcje nabyte przez pacjenta w czasie pobytu w szpitalu, które jednak nie ujawniły się klinicznie aż do wypisu ze szpitala. Zakażenia oportunistyczne rozwijają się u pacjentów z uszkodzonymi mechanizmami obronnymi. Wywołują je czynniki zakaźne, które u zdrowych ludzi zwykle nie powodują choroby. Przyczyną wielu infekcji oportunistycznych są mikroorganizmy wchodzące w skład własnej mikroflory pacjenta (autoinfekcja), a te infekcje oportunistyczne są często nieuniknione, gdyż ich rozwój wiąże się z wadami błon śluzowych lub innymi mechanizmami ochronnymi (infekcja autochtoniczna).

Jednym z najpowszechniejszych patogenów – odpowiada za około 19% zakażeń szpitalnych – jest Escherichia coli. Mikroorganizm ten jest komensalem przewodu pokarmowego, skąd w przypadku naruszenia przepuszczalności normalnych barier anatomicznych może rozprzestrzeniać się i wpływać na sąsiednie narządy. Po tym, jak infekcja dostanie się do ogniska pierwotnego, jej dalsze rozprzestrzenianie się następuje poprzez krwioobieg. Powstała bakteriemia, która jest możliwa w przypadku wszystkich infekcji Gram-ujemnych, może prowadzić do wstrząsu wywołanego endotoksynami. Do czynników predysponujących do bakteriemii zalicza się cukrzycę, marskość wątroby, białaczkę, chłoniaka lub raka, chemioterapię przeciwnowotworową czy leki immunosupresyjne, a także szereg zabiegów chirurgicznych oraz zakażenia dróg moczowych, żółciowych i żołądkowo-jelitowych. Do grup szczególnego ryzyka należą noworodki, kobiety w ciąży i osoby starsze z zaburzeniami układu moczowego wynikającymi z patologii prostaty.

W ponad 50% chorób wywoływanych przez E. coli punktem wejścia infekcji są drogi moczowe; Często występują także infekcje pochodzące z wątroby i dróg żółciowych jamy brzusznej, skóry i płuc.

Morfologia, fizjologia. Escherichia to pałeczki o wymiarach 1,1 – 1,5 x 2,0 – 6,0 mikronów. Znajdują się one losowo w preparatach. Te ruchliwe są pertrichous, ale istnieją również odmiany pozbawione wici. Wszystkie Escherichia mają fimbrie (pili). Rozmnażają się w temperaturze 37°C i tworzą kolonie S i R na gęstym podłożu (pożywka Endo). W płynnych mediach powodują zmętnienie, a następnie osad. Wiele szczepów ma kapsułkę lub mikrokapsułkę i tworzy kolonie śluzowe na pożywce.

Właściwości biochemiczne Escherichia określa się poprzez odróżnienie Escherichia od przedstawicieli innych rodzajów, rodziny Enterobacteriaceae. Tworzą indol, nie dają pozytywnej reakcji Vogesa-Proskauera, nie tworzą H2S i wytwarzają enzymy rozkładające glukozę, laktozę, sacharozę, mannitol z utworzeniem kwasu i gazu.

Antygeny. Escherichia ma antygeny somatyczne (O), otoczkowe (K) i wiciowe (H). W oparciu o specyficzność antygenu O, E. coli dzieli się na serogrupy (około 170). Wiele szczepów poszczególnych serogrup ma wspólne antygeny z mikroorganizmami innych Escherichia, a także Shigella, Salmonella i innymi enterobakteriami.

Antygeny K w Escherichia składają się z 3 antygenów - A, B, L, różniących się wrażliwością na działanie temperatury: antygeny B i L są termostabilne i ulegają zniszczeniu przez gotowanie; A-anigen jest termostabilny i ulega inaktywacji dopiero w temperaturze 120°C. Umiejscowienie antygenów K na powierzchni maskuje antygen O, który określa się po zagotowaniu kultury testowej. W Escherichia znanych jest około 97 serotypów antygenów K.

Antygeny H są specyficzne dla typu i charakteryzują specyficzny serotyp w obrębie grup O. Opisano ponad 50 różnych antygenów H.

Czynniki patogeniczności Escherichia i patogeneza Escherichiozy. Escherichia coli posiada czynniki adhezji, kolonizacji (fimbrie i pilusy, fibryle) i toksyczności (endotoksyny, enterotoksyny, hemolizyny, lecytyny).

Endotoksyny mogą wywołać wstrząs septyczny w bakteriemii poprzez wpływ na błony komórkowe oraz elementy układu krzepnięcia krwi i dopełniacza (szlachetna droga klasyczna i alternatywna), co prowadzi do zwiększonej krzepliwości krwi, uszkodzenia komórek i zaburzeń przepływu krwi, zwłaszcza mikrokrążenia.

Enterotoksyny o charakterze białkowym (o syntezie decyduje plazmid Ent) - termolabilne (LT), przypominające cholerogeny, składają się z pięciu podjednostek B i jednej podjednostki A (wnikają do komórki i aktywują cyklazę adenylanową), szybko działające i termostabilne ( ST) działa powoli.

Syntezę hemolizyn zapewnia plazmid Hly.

Normalnym mieszkańcem jelita ludzkiego jest oportunistyczna E. coli, która posiada endotoksyny i fimbrie (pili) i w normalnych warunkach nie powoduje żadnych chorób.

Ostre choroby jelit wywoływane są przez patogenną Escherichia. W zależności od kombinacji czynników chorobotwórczych wyróżnia się:

1. ETE (enerotoksyczna Escherichia), w której dominuje enterotoksyna. Kolonizują mikrokosmki, nie uszkadzając ich, powodując nadmierne wydzielanie płynów, ciężką biegunkę i odwodnienie (biegunka podróżnych, choroby choleropodobne u dzieci). Grupy serologiczne O4, O6, O20, O78 itd.

2. EPE (enteropatogenna Escherichia), powoduje zapalenie żołądka i jelit, kolonizując plazmalemę z uszkodzeniem nabłonka. Grupy serologiczne O26, O55, O111.

3. EIE (enteroinwazyjne Escherichia) namnażają się wewnątrz komórek nabłonkowych, powodując ich niszczenie i powodując choroby podobne do czerwonki. Grupy serologiczne O124, O144.

4. Escherichia, powodująca krwotoczne zapalenie jelita grubego (działająca na przepuszczalność naczyń) O157.

Drogi zakażenia fekalno-ustne, domowe (poprzez sprzęt medyczny, autoinfekcja). Źródłem zakażenia jest człowiek. Duże znaczenie ma możliwość szybkiego rozprzestrzeniania się patogennych plazmidów wśród pokrewnych mikroorganizmów.

Diagnostyka Escherichiozę przeprowadza się metodą bakteriologiczną. W pierwszym etapie – posiew materiału (kał w przypadku ostrej choroby układu oddechowego, mocz w przypadku zapalenia układu moczowo-płciowego, żółć, przedziały ropne, krew w przypadku kolisepsy) na podłoża diagnostyki różnicowej (pożywka Endo), w drugim etapie – identyfikacja kolonii, mikroskopia Grama; przeprowadzenie reakcji aglutynacji na szkle z materiałem z poszczególnych kolonii z poliwalentną surowicą O (w celu określenia gatunku), następnie z jednowartościową surowicą O i H; przenieść na pożywkę Ressela (czysta kultura). W trzecim etapie w reakcji aglutynacji na szkle określa się przynależność do serogrup i serowariantów, a w probówkach przeprowadza się szczegółową reakcję aglutynacji; określić właściwości biochemiczne (wysiew w rzędzie pstrokatym, reakcja Vogesa-Proskauera); przeprowadzić typowanie fagowe, określić wrażliwość na antybiotyki.

Zapobieganie i leczenie. W zapobieganiu koinfekcjom małych dzieci, pierwszorzędne znaczenie ma przestrzeganie zasad sanitarno-higienicznych w szpitalach położniczych i placówkach dziecięcych, gdzie istnieje niebezpieczeństwo rozprzestrzeniania się patogennej Escherichia. Należy zidentyfikować pacjentów i nosicieli, a następnie odizolować ich i leczyć je.

Strona 47 z 91

Escherichia coli została odkryta w 1885 roku przez Eschericha i nazwana Escherichia coli. Bakterie te, żyjące w jelitach ludzi i zwierząt, w pewnych warunkach mogą stać się zjadliwe i powodować szereg procesów patologicznych.
Morfologia i właściwości tynkarskie. E. coli ma wygląd prostego pręta z zaokrąglonymi końcami, o długości od 2,5 do 3 mikronów i szerokości od 0,5 do 0,8 mikrona. Czasami występują formy zbliżające się do ziarniaków lub długich włókien (ryc. 78).
Właściwości kulturowe i biochemiczne. Escherichia coli rozmnaża się w warunkach tlenowych w temperaturze 37°. Nie jest wybredny, jeśli chodzi o pożywki. Na zwykłym agarze po dniu wzrostu tworzą się drobnoziarniste mleczno-niebieskawe kolonie o średnicy 2-3 mm. Daje równomierne zmętnienie bulionu. Pod koniec dnia tworzy indol. Mleko stwardnieje po 1-4 dniach w wyniku tworzenia się kwasu mlekowego. E. coli rozkłada glukozę, maltozę, laktozę i mannitol, tworząc kwas i gaz. Nie upłynnia żelatyny.

Ryż. 78. Bakterie z grupy dur brzuszny.
1- wici pałeczki duru brzusznego; 2 - kolonie; 3 - rozmazy z kultury: a - dur brzuszny; b - dur brzuszny; c - czerwonka; g - Escherichia coli; 4 - tworzenie kolonii w S. Schottmti lleri.
Wyróżniająca się szeroką zdolnością adaptacji do zmieniających się warunków życia, E. coli może zmieniać swoje właściwości biochemiczne. Pod tym względem wyróżnia się następujące odmiany:

Struktura antygenowa. Badania Kaufmana wykazały, że E. coli ma złożoną strukturę antygenową, składającą się z trzech różnych typów antygenów:

1. antygen somatyczny termostabilny (antygen O);
2. wiciowy, termolabilny antygen (antygen H);
3. Powierzchnia somatyczna, otoczka lub termolabilny antygen K, który zawiera różne antygeny powierzchniowe, otoczki (L, B, Vi - antygeny termolabilne i A, M-termostabilne).

Opór. Po ogrzaniu w zawiesinie E. coli ginie w temperaturze 55° po godzinie i w temperaturze 60° po 15 minutach. W 1% roztworze kwasu karbolowego umiera w ciągu 5-15 minut.
Patogeniczność dla zwierząt i powstawanie toksyn. Niektóre odmiany E. coli mają właściwości chorobotwórcze. Pozajelitowe podawanie takich kultur zwierzętom laboratoryjnym często powoduje ich śmierć z powodu objawów sepsy.
E. coli zawiera endotoksynę. Istnieją jednak pręciki wytwarzające egzotoksyny działające na układ nerwowy.
Choroby człowieka wywołane przez Escherichia coli. Escherichia coli jest stałym bywalcem jelit zdrowego człowieka (głównie jelita grubego) i zaliczana jest do drobnoustrojów warunkowo chorobotwórczych. W warunkach naturalnych pełni nawet pozytywną rolę, będąc antagonistą czerwonki, duru brzusznego i niektórych drobnoustrojów gnilnych. W procesie swojej życiowej aktywności tworzy witaminy B i E. Ustalono, że stosowanie niektórych antybiotyków o szerokim spektrum działania hamuje aktywność życiową E. coli i prowadzi do poważnych zaburzeń jelitowych. W pewnych warunkach, które powodują zmniejszenie odporności makroorganizmu (przepracowanie, wyczerpanie itp.), Mikroorganizm ten może powodować różne ropne choroby jelit (na przykład zapalenie wyrostka robaczkowego) i dróg moczowych. Czasami powoduje zapalenie dróg żółciowych i pęcherzyka żółciowego. Wnikając przez wrzody jelit podczas duru brzusznego i czerwonki, E. coli może powodować zapalenie otrzewnej. E. coli może przedostać się do krwi przez nienaruszoną błonę śluzową jelit, co wyjaśnia zakażenie bakteriami colibacillarnymi.
Choroby te mają charakter endoinfekcji (autoinfekcji) i nie przenoszą się z chorego na zdrowego. Jednakże E. coli może powodować choroby egzogenne. Są to tak zwane enteropatogenne szczepy E. coli. Właściwościami morfologicznymi i biochemicznymi nie różnią się od zwykłej E. coli, są jednak wysoce patogenne dla dzieci i bardziej odporne na działanie soków żołądkowych i dwunastniczych. Ich główna różnica polega na strukturze antygenowej i specyficzności typu. Antygen O jest nieodłączny dla wszystkich wariantów Escherichia coli, powierzchniowy antygen K występuje tylko w enteropatogennych. Identyfikacja antygenów K umożliwiła skonstruowanie diagnostycznego schematu antygenowego i za jego pomocą podział enteropatogennej Escherichia coli na kilka typów serologicznych (0-25, 0-26, 0-55, 0-86, 0- 127, 0-128 itd.). Antygen K jest ściśle specyficzny dla każdego serotypu Escherichia coli. Na przykład 0-26 ma „K”6, 0-11 ma „K”4, 0-55 ma „K”5 itd. Obecnie istnieje około 40 enteropatogennych bakterii E. coli.
Enteropatogenne bakterie Escherichia coli powodują zapalenie żołądka i jelit u noworodków i małych dzieci, któremu czasami towarzyszy uszkodzenie wątroby i znaczne zatrucie. Epidemie tych chorób w placówkach dziecięcych mają charakter kontaktowy lub kontakt z żywnością. Mogą również powodować procesy ropno-zapalne i infekcje toksyczne dla żywności (zatrucie pokarmowe).
Diagnostyka mikrobiologiczna. W przypadku infekcji endogennej przesłany materiał (żółć, mocz, wydzielina z macicy itp.) poddawany jest badaniu bakteriologicznemu.
Pierwszy dzień. Wysiew materiału na płytki z pożywką Endo lub Levina. Uprawy umieszcza się w termostacie na 24 godziny w temperaturze 37°.
Drugi dzień. Badanie bakterioskopowe kolonii czerwonych z metalicznym odcieniem lub bezbarwnych, wilgotnych. Jeśli są w nich małe pałeczki Gram-ujemne, należy je przesadzić na skośny agar i umieścić w termostacie na 24 godziny w temperaturze 37°.
Trzeci dzień. Ponowne zaszczepienie czystej kultury bakterii węglowodanami z różnorodnej serii - laktozą, glukozą, maltozą, mannitolem, sacharozą i bulionem (w celu oznaczenia indolu).
Czwarty dzień. Rachunkowość upraw.
Hodowlę, która nie rozkłada laktozy i nie tworzy indolu, bada się w reakcji aglutynacji ze specyficznymi surowicami Salmonella. Jeżeli reakcja aglutynacji daje wynik negatywny, wyizolowany szczep należy uznać za paracoliform (E. paracoli).
Badania prowadzi się inaczej w przypadku zapalenia żołądka i jelit i zapalenia okrężnicy u dzieci.
Pierwszy dzień. Zaszczepianie kału i wymiocin na szalkach z pożywką Endo lub Levin trzyma się w termostacie przez 24 godziny w temperaturze 37°.
Drugi dzień. Co najmniej 10 kolonii, metalicznie czerwonych, różowych lub bezbarwnych, sprawdza się za pomocą orientacyjnego testu aglutynacji z poliwalentną aglutynującą surowicą OK (zawierającą przeciwciała przeciwko kilku serotypom Escherichia coli). Surowicę przygotowuje się przez zmieszanie standardowych surowic najczęściej izolowanych serotypów Escherichia coli. Kolonię, która uległa aglutynacji z surowicą poliwalentną, bada się za pomocą jednoważnej surowicy specyficznej dla danego typu kolonii w rozcieńczeniu 1:10, tj. ustala się serotyp Escherichia coli. Następnie z kolonii, która dała dodatnią reakcję aglutynacji, przeprowadza się podhodowlę na skośnym agarze i tę probówkę umieszcza się w termostacie na 24 godziny w temperaturze 37°. Jeżeli nie nastąpi aglutynacja bakterii z kolonii, wynik jest negatywny.
Trzeci dzień. Hodowlę na skośnym agarze zmywa się sterylną solą fizjologiczną, popłuczynę przenosi się do sterylnej probówki i gotuje w łaźni wodnej przez 1-2 godziny. W przypadku ogrzanej hodowli przeprowadza się orientacyjną reakcję aglutynacji z surowicą specyficzną dla danego typu bakterii, która aglutynowała bakterie w stanie żywym,
Jeżeli reakcja będzie pozytywna, podawana jest orientacyjna odpowiedź, np.:

ANALIZA Liczba kału dziecka Pietrowa Siergieja (6 miesięcy).
W badaniu bakteriologicznym kału wyizolowano patogenną Escherichia coli (serotyp 0-26).
Asystent labolatoryjny
Zaleca się uzupełnienie badania szczegółową reakcją aglutynacji. Miana antygenów O i K podano na etykiecie ampułki z surowicą aglutynującą. Dlatego surowicę rozcieńcza się w dwóch rzędach probówek. W celu wykrycia antygenu K do jednego rzędu probówek dodaje się żywą kulturę wypłukaną z nachylonego agaru; Do wykrycia antygenu O stosuje się hodowlę gotowaną przez godzinę. Gotowanie powoduje zniszczenie antygenu B, zlokalizowanego bardziej powierzchownie niż antygen O. Probówki umieszcza się w termostacie w temperaturze 37° na jeden dzień. Szczepy homologiczne do surowicy aglutynuje się do miana lub połowy miana.
Konkretna terapia. W leczeniu przewlekłych procesów zapalnych wywołanych przez Escherichia coli wskazana jest autoszczepionka i bakteriofag. Ostatnio zaleca się stosowanie leków sulfonamidowych, streptomycyny, chloramfenikolu, chlorotetracykliny, myceryny, kolimycyny i neomycyny.

STYLAB oferuje systemy testowe do oznaczania Escherichia coli (E. coli) w próbkach żywności i środowiska przy użyciu metod mikrobiologicznych, PCR w czasie rzeczywistym i aglutynacji lateksowej.

Escherichia coli ( Escherichia coli) to fakultatywnie beztlenowa Gram-ujemna, ruchliwa bakteria w kształcie pałeczki, która jest częścią normalnej mikroflory jelitowej większości stałocieplnych zwierząt, w tym ludzi. Istnieje wiele serotypów E. coli, z których większość jest nieszkodliwa lub nawet korzystna dla żywiciela. Bakterie tworzące mikroflorę zapobiegają namnażaniu się innych bakterii, w tym patogennych. Ponadto E. coli wytwarza witaminę K. Jednak niektóre serotypy mi. coli może spowodować poważną chorobę. Morfologicznie nieszkodliwe i patogenne bakterie E. coli nie różnią się, dlatego w celu określenia patogeniczności mikroorganizmu należy przeanalizować jego antygeny.

Bakterie E. coli mogą należeć do różnych serogrup i mieć różne antygeny. Grupa serologiczna to grupa bakterii mających wspólny antygen; może obejmować więcej niż jeden serotyp, gatunek lub rodzaj. Dla mi. coli najbardziej znane są enteropatogenne serogrupy E. coli O26, O55, O86, O111, O114, O119, O125, O126, O127, O128, O142 i O158. Do tych grup mogą również należeć inne typy patogennych bakterii E. coli. Na przykład w DAEC zidentyfikowano serogrupy O86, O127, O142 i O158.

Istnieje sześć typów patogennych bakterii E. coli.

• Enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC, w skrócie STEC dla E. coli wytwarzającej toksynę Shiga i VTEC dla E. Coli wytwarzającej werotoksynę). Bakterie te wytwarzają dwie toksyny zwane toksynami podobnymi do Shiga (podobnymi do Shigella). EHEC powoduje choroby o objawach podobnych do czerwonki, którym towarzyszy biegunka krwotoczna. W ciężkich przypadkach może rozwinąć się zespół hemolityczno-mocznicowy (HUS). EHEC obejmuje serotypy Escherichia coli O104:H4, O157:H7 i kilka innych.
• Enterotoksyczna Escherichia coli (ETEC) wytwarza toksyny termolabilne i termostabilne, z których ta ostatnia jest podobna do toksyny Vibrio cholerae. Choroby wywoływane przez tę bakterię charakteryzują się wodnistą biegunką, gorączką i, w niektórych przypadkach, nudnościami.
• Enteroinwazyjna Escherichia coli (EIEC) powoduje choroby podobne do czerwonki prątkowej. Bakterie te wnikają do komórek nabłonka jelit i namnażają się w nich.
• Enteropatogenna Escherichia coli (EPEC) powoduje biegunkę częściej u dzieci niż u dorosłych. Jego mechanizm działania różni się od ETEC i EIEC: bakterie te przyczepiają się do komórek nabłonka jelit, ale ich nie penetrują. Choroby wywołane EPEC mogą trwać do 2 tygodni.
• Enteroagregacyjna Escherichia coli (EAEC) również powoduje choroby, głównie u dzieci. Bakterie przyczepiają się do nabłonka jelit i uwalniają toksyny.
• Rozproszona przylegająca Escherichia coli (DAEC) powoduje łagodną biegunkę u dzieci, szczególnie tych poniżej 2 roku życia. Jednakże mikroorganizm ten stwierdzono także u zdrowych dzieci, a także u zdrowych dorosłych.

E. coli może powodować nie tylko zapalenie jelit i toksyczne infekcje, ale także zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych u noworodków, infekcje dróg oddechowych, infekcje dróg moczowych i bakteriemię – ogólne uszkodzenie organizmu spowodowane przez bakterie, które przedostały się do krwi.

mi. coli jest jednym z najlepiej zbadanych organizmów. Genom jednego szczepu tych bakterii został całkowicie zsekwencjonowany w 1997 roku. Escherichia coli wykorzystywana jest w eksperymentach genetycznych i mikrobiologicznych, a także w badaniach specjacji. Ponadto za pomocą tych bakterii syntetyzuje się różne białka, w szczególności analog insuliny ludzkiej, niektóre enzymy itp. Wykorzystuje się je również do produkcji szczepionek. Trwają badania nad wykorzystaniem bakterii E. coli do produkcji paliwa.

W Federacji Rosyjskiej i krajach Unii Celnej zawartość E. coli w produktach spożywczych ograniczają TR CU 021/2011 „W sprawie bezpieczeństwa produktów spożywczych”, TR CU 033/2013 „W sprawie bezpieczeństwa mleka i produkty mleczne” i inne przepisy techniczne. Aktualne informacje legislacyjne można znaleźć na stronie internetowej kompaktowy24. kom .

Do oznaczania E. coli w próbkach stosuje się zarówno metody mikrobiologiczne (podłoża selektywne, substraty testowe), jak i oznaczanie DNA metodą PCR. Jako szybki test stosuje się prostą i szybką metodę aglutynacji lateksowej.

Literatura

1. OK. Pozdeev. Mikrobiologia medyczna. Moskwa, GEOTAR-MED, 2001.
2. Oficjalna strona CDC.
3. Germani Y, Bégaud E, Duval P, Le Bouguénec C. Występowanie enteropatogennych, enteroagregacyjnych i rozproszonie przylegających Escherichia coli wśród izolatów od dzieci z biegunką w Nowej Kaledonii. J Infect Dis. 1996 listopad;174(5):1124-6.
4. Mansan-Almeida R, Pereira AL, Giugliano LG. Rozproszone przylegające szczepy Escherichia coli wyizolowane od dzieci i dorosłych stanowią dwie różne populacje. BMC Mikrobiol. 1 lutego 2013 r.;13:22.
5. Isabel C. A. Scaletsky, Sandra H. Fabbricotti, Rozane L. B. Carvalho, Claudia R. Nunes, Helcio S. Maranhão, Mauro B. Morais i Ulysses Fagundes-Neto Rozproszona przyczepność Escherichia coli jako przyczyna ostrej biegunki u małych dzieci w północno-wschodniej Brazylii: badanie kliniczno-kontrolne. J Clin Microbiol. luty 2002; 40 ust. 2: 645-648.